еректилния

  • Обобщение
  • Въведение
  • материали и методи
  • Животни
  • ICP измерване при плъхове
  • Вътресъдова канюлация и измерване на кръвното налягане.
  • Поведенчески тестове при плъхове.
  • Статистика
  • Резултати
  • Ефект на силденафил върху стимулирани от нервите еректилни реакции
  • Ефект на йохимбин върху стимулирани от нервите еректилни реакции
  • Ефект на комбинации от силденафил/йохимбин върху стимулирани от нервите еректилни отговори
  • Ефект на комбинацията от силденафил, йохимбин и силденафил/йохимбин върху параметрите на чифтосване
  • Ефект върху SAP
  • Дискусия

Обобщение

Въведение

Сексуалното поведение и еректилната функция се влияят от емоционалните и когнитивните функции. На нивото на централната нервна система хипоталамусната и лимбичната системи са отговорни за централните еректогенни сигнали, които улесняват пътищата на гръбначния мозък, което води до ерекция през периферните автономни нерви. 1 Съвременните стратегии за фармакологично лечение на еректилна дисфункция (ЕД) благоприятстват използването на перорални средства, включително PDE5 инхибитори, фентоламин, йохимбин, L-аргинин и др. 12

Въвеждането на силденафил цитрат (Viagra Pfizer Inc., Ню Йорк, Ню Йорк, САЩ) през 1998 г. е пробив в подобряването на еректилната функция и дава възможност за успешен полов акт при мъже с ЕД от разширен спектър. 3, 4 Йохимбин е индол алкалоид, чиято афродизиачна активност може да бъде медиирана от комбинация от ефекти на централната нервна система и периферни ефекти, включително блокиране на пре- и постсинаптичните α2 адренергични рецептори. 5,6,7-плацебо-контролирани проучвания предполагат ефективността на йохимбин при лечението на ЕД поради лека психогенна или органична етиология, но резултатът от употребата му е разочароващ. 8

След появата на силденафил се наблюдава възраждане на интереса към еректилната дисфункция и увеличаване на броя на пациентите със заболяването. 9 Въпреки това, няколко проучвания показват, че приложението на силденафил не може да доведе до достатъчна твърдост за задоволителен полов акт при 11-22% от пациентите с психогени и 36-65% с органична ЕД. 10, 11 Комбинираната лекарствена терапия изглежда привлекателна за лечението на пациенти с ЕД, при които монотерапията със силденафил е неуспешна. Следователно, комбинирането на централно действащото лекарство йохимбин с периферния балсам силденафил може да бъде привлекателен подход. Следователно, това проучване е предназначено да изследва ефекта на йохимбин върху индуцираното от силденафил улесняване на централно и периферно медиирания еректилен процес при мъжки плъхове.

материали и методи

Животни

Експериментите са проведени при мъжки плъхове албиноси с тегло 200-350 g (приблизително на възраст от 4 до 6 месеца) и женски плъхове албиноси с тегло 150-200 g. Всички използвани животни са отглеждани в къщата за животни на Фармацевтичния факултет съгласно насоките на NIH, настанени в постоянни условия на околната среда, диети, хранени с пшеница или хляб, напоен с мляко. Водата беше разрешена ad libitum .

ICP измерване при плъхове

Проведени са експерименти за измерване на промените в интракавернозното налягане (ICP), причинени от електрическа стимулация на кавернозния нерв (CN) при анестезирани плъхове, съгласно метода, описан от Giuliani et al. 12 мъжки плъхове бяха анестезирани чрез интраперитонеално инжектиране на тиопентал (50 mg kg -1), след това беше изрязана кожата, покриваща пениса, и препуциума бе оголен, за да се разкрият кавернозните тела. Игла с калибър 26, пълна с хепаринизиран физиологичен разтвор, беше внимателно вкарана в кавернозното тяло от едната страна, за да се измери ICP. Иглата беше запечатана към 20 см дълга полиетиленова тръба 50, пълна с хепаринизиран физиологичен разтвор, свързана с преобразувател на налягане Gould-Statham (Oxnard, CA, USA). ICP се показва на полиграф Grass (Модел 7D, Grass Inst. Co., MA, САЩ).

Вътресъдова канюлация и измерване на кръвното налягане.

Измерването на кръвното налягане и сърдечната честота при плъхове се извършва, както е описано по-рано от Tseng et al. 14 Направен е приблизително 1 см разрез в кожата на слабините и подрязаните мускули са изрязани, след това феморалната артерия и вената са изложени и освободени от подлежащите мускули. С помощта на фини ножици или извита на 90 ° игла е направен малък разрез в артерията близо до затворен ремък, през който е въведен 20-сантиметров полиетиленов катетър, пълен с хепаринизиран физиологичен разтвор. Артериалният катетър беше свързан с преобразувателя на налягане и кръвното налягане се показваше на полиграф Grass.

Поведенчески тестове при плъхове.

Тестовете за копулаторно поведение при плъхове се извършват, както е описано по-рано от Butcher et al. 15 Мъжки и женски плъхове бяха настанени при стайна температура в продължение на 1 седмица преди началото на експерименталния период, три или четири в клетка. Всички експерименти бяха проведени между 1100 и 1500 часа в шумозаглушена стая. 16 Сексуалната активност на плъховете беше оценена след четири теста за подбор на чифтосване с възприемчиви жени. След скрининговите тестове животните бяха допуснати до експерименталната сесия, ако бяха показали поне една еякулация на тест. 17 Нормалният модел на полов акт при мъжки плъхове се характеризира със следната последователност на поведение: (1) монтиране на женската, последвано от проникване на пениса с продължителност приблизително 1/3 s, (2) оттегляне на пениса и демонтиране и (3 ) кратък интервал на почивка от приблизително 40-60 s. Тази последователност се повтаря няколко пъти, докато настъпи еякулация с крайното проникване на серията. Еякулацията е идентифицирана чрез енергична млечница и по-дълъг период на проникване и винаги е била последвана от период на почивка (интервал след еякулация (PEI)) от 10-15 минути. петнадесет

Estrous се индуцира при женска стимулация чрез комбинирано лечение с естроген и прогестерон. Четиридесет и осем часа преди тестването, жените са инжектирани подкожно с 60 μg kg -1 естрадиол бензоат, последвано от 1 mg kg -1 прогестерон 4 часа преди периода на наблюдение. След 10-минутен адаптационен период в клетката за наблюдение, възприемчива жена беше въведена на мъжа, като внимателно я пусна в клетката. Чрез пряко наблюдение бяха записани следните поведенчески параметри:

Латентност на монтажа (ML): времето от въвеждането на женската до появата на първото монтиране;

латентност на проникване (IL): времето от въвеждането на женската до появата на първото проникване;

латентност на еякулацията (EL): време от първото проникване до еякулация;

PEI: време от еякулация до последващо проникване;

честота на проникване (IF): брой нахлувания, които предхождат еякулацията;

честота на еякулация (EF): брой на еякулацията за една сесия; Y.

интеркопулационен интервал (ICI): среден интервал между последователни прониквания (EL/IF).

Тестовите сесии продължиха 30 минути. Всяко мъжко животно служи като свой собствен контрол. Всеки плъх се използва само два пъти, веднъж като контрола, а вторият (след поне 48 часа), както е третиран. Лекарството, комбинацията или носителят (физиологичен разтвор) се инжектират интраперитонеално 1 час преди тестовата сесия. Времето между двата периода (контролен и лекуван) трябва да бъде най-малко 48 часа.

Статистика

Стойностите бяха изразени като средно ± sem. Тестът на Student беше използван за анализ на сдвоени данни. За многократно сравнение беше извършен еднопосочен дисперсионен анализ (ANOVA или F тест), последван от Dunnet или пост-тест на Student-Newman-Keuls. Критерият за статистическа значимост е установен на ниво 0,05. В целия ръкопис 'n' показва броя на плъховете.

Резултати

Ефект на силденафил върху нервно стимулирани еректилни отговори

Този набор от експерименти започна с 3–5 CN стимулации на различни честоти, за да се избере подходяща честота, която да доведе до субмаксимално увеличение на ICP. Субмаксималната честота (обикновено между 1 и 6 Hz) се повтаря два пъти; беше получен възпроизводим отговор. След това тестваното лекарство се инжектира iv и кавернозните отговори на CN стимулация се записват в продължение на 5 минути след прилагане на лекарството (Фигура 1). Силденафил предизвиква потенциране на неврогенния еректилен отговор при всички използвани концентрации със значителни нива, достигнати при концентрации 10 μmol kg -1. Електрическата стимулация на CN дава ICP/SAP стойност от 0,413 ± 0,075 mm Hg в присъствието на 1 mmol kg -1 силденафил в сравнение с 0,095 ± 0,016 mm Hg в негово отсъствие 1 минута след iv инжекция, n = 8 (Фигура 2 ) .

Представителна следа, показваща ефекта от интравенозното приложение на силденафил върху вътрекавернозните промени в налягането и средното системно артериално налягане, свързано с кавернозна нервно-стимулирана ерекция на пениса при анестезирани плъхове.

Изображение в пълен размер

Ефект на iv силденафил (1 μmol kg -1 до 1 mmol kg -1) върху еректилните реакции на електрическа стимулация на кавернозния нерв, 1 минута ( да се ) и 5 ​​минути ( б ) след инжектиране. Резултатите са изразени като средно ± sem от осем експеримента. * Обозначава значителна разлика в сравнение с контрола на нивото на P -1 до 1 mmol kg -1) не е увеличил значително ICP/SAP в сравнение с контролните стойности нито на 1 минута, нито на 5 минути след инжектиране iv, n = 7 ( Фигура 3).

Ефект на iv йохимбин (0,1 μmol kg -1 до 1 mmol kg -1) върху еректилните реакции на електрическа стимулация на кавернозния нерв, 1 минута ( да се ) и 5 ​​минути ( б ) след инжектиране. Резултатите са изразени като средно ± sem от седем експеримента. ICP: вътрекавернозно налягане; iv, интравенозно; SAP, системно кръвно налягане.

Изображение в пълен размер

Ефект на комбинации от силденафил/йохимбин върху стимулирани от нервите еректилни отговори

Увеличението на ICP в отговор на електрическа стимулация на CN е регистрирано преди и след IV инжектиране на комбинации от йохимбин 1 μmol kg -1 с нарастващи дози силденафил (1 μmol kg -1 до 1 mmol kg -1). Ефектът от всички тествани комбинации е значително по-голям от ефекта само на йохимбин. Една минута след iv приложение, процентното засилване на ICP/SAP, индуцирано от комбинация от 10 μmol kg -1 силденафил и 1 μmol kg -1 йохимбин, е значително по-голямо от ефекта само на силденафил и този на сумата алгебричен за отделните ефекти, показващо синергично действие. Подобно действие се наблюдава при комбинация с по-висока доза (силденафил 1 mmol kg -1 и йохимбин 1 μmol kg -1) 5 минути след инжектирането, n = 7 (Фигура 4).

Ефект на йохимбин (1 μmol kg -1) върху различни параметри на копулация при мъжки плъхове. Стойностите се изразяват като средно ± sem от осем експеримента. Плъховете се инжектират интраперитонеално с лекарството 1 час преди 30-минутна експериментална сесия. * Обозначава значителна разлика в сравнение с контролата на ниво P

Ефект на силденафил (10 μmol kg -1) върху различни параметри на копулация при мъжки плъхове. Стойностите се изразяват като средно ± sem от осем експеримента. Плъховете се инжектират интраперитонеално с лекарството 1 час преди 30-минутна експериментална сесия. * Обозначава значителна разлика в сравнение с контролата на ниво P

Ефектът на йохимбина върху еректилната функция изглежда е централно медииран, тъй като в настоящото проучване неговата остра интраперитонеална инжекция намалява латентността на монтиране и еякулация, ICI и PEI, отразявайки повишаване на сексуалната мотивация. Тези резултати са в съответствие с предишни проучвания върху животни, които показват, че лекарството има осезаем положителен ефект върху сексуалната активност. 29, 30, 31 Йохимбин съобщава, че улеснява сексуалната възбуда, въздействайки на α2 адренергичните рецептори в централната нервна система. 2, 32, 33 Интересното е, че йохимбинът може да стимулира серотониновите рецептори в мозъка, 32 а засиленото серотонинергично предаване стимулира секрецията на окситоцин в кръвта на мъжки плъхове, което от своя страна подобрява сексуалното поведение и ерекцията. 34 Освен това се предполага, че допаминергичната система може да бъде последният път за изразяване на поведението, индуцирано от йохимбин. 35

В подобен опит за изследване на ефекта от комбинирането на йохимбин с NO балсам, Lebret et al. 42 демонстрира, че прилагането при поискване на 3,25 g предшественик на NO L-аргинин и 6 mg йохимбин, приложени 1-2 часа преди планирания полов акт, значително подобрява еректилната функция при пациенти с лека до умерена еректилна дисфункция. Резултатите от настоящото проучване, които все още не са клинично доказани, показват, че комбинацията от силденафил и йохимбин за лечение на ЕД може да бъде от полза.

Заключението е, че йохимбин може да усили и удължи ефекта на силденафил върху еректилния процес при плъхове, без да причинява съпътстваща хипотония. Силденафил може да засили централните ефекти на йохимбина върху ерекцията: възможният благоприятен ефект на комбинацията е по-силно изразен в централния компонент (сексуално поведение), отколкото в периферния компонент на еректилния процес. Силденафил усилва ефекта на йохимбин върху копулаторните показатели на мъжете, но не и върху мъжката сексуална мотивация. Следователно, употребата на по-ниски дози силденафил в комбинация с йохимбин може да представлява потенциално предимство при лечение на случаи на ЕД, които не реагират само на силденафил.