Ефекти на протеолитичните ензими и сексуални
абстиненция на нива на -глюкозидаза
в човешката семенна плазма

ензими

Patricio Peña S 1,2, Raúl Sánchez G, Белгия Vasquez P 1,3,
Клаудия Кастило К 1, Вернер Миска 4

Получено на 18 декември 2000 г. Прието в коригирана версия на 16 януари 2001 г.
Източник на финансиране: Програма MECE-SUP FRO-98, Проект: "Укрепване на
Регионален научен, технологичен и производствен капацитет. "Дирекция" Изследвания "
(9735-9820), Universidad de La Frontera Temuco и DFG-GTZ-93.2157.106.100.
Катедра за фундаментални науки, Катедра за предклинични науки и Център за биотехнологии в репродукцията, Медицински факултет, Университет де Ла Фронтера, Темуко, Чили.
Андрологичен отдел, J-L-Universität Giessen, Германия.
1 медицински специалист, 2 MCS, 3 бакалавърска степен

Това проучване е проектирано със следните цели: 1) да се получат референтни стойности на α-глюкозидаза, присъстваща в семенната плазма на нормални донори. 2) определя в пробите от сперма от нормални донори ефекта от добавянето на протеолитичния ензим а-химотрипсин върху активността на а-глюкозидазата; и 3) да се оцени възможният ефект от продължителността на сексуалното въздържание върху активността на α-глюкозидазата в серийни проби на пациенти от Програмата за криоконсервация на спермата.

МАТЕРИАЛ И МЕТОД

След консултация и одобрение от Комитета по етика на Медицинския факултет, чрез информирано съгласие, бяха избрани донори за това проучване сред студенти от нашия университет и пациенти, които са посещавали андрологичната поликлиника, като се изключват от нея субекти с предишни заболявания и предаване по полов път. Оценката на α-глюкозидазата е рутинно определяна в семенната плазма от пациенти, изискващи криоконсервация на сперматозоиди.

Ефект на α-химотрипсина върху активността на α-глюкозидазата. Нарастващи концентрации (от 0,1 до 10 mg/ml) на α-химотрипсин 18 се добавят към семенни плазмени проби от нормални донори (n = 6), които се поддържат при -20 ° C до анализа. Впоследствие активността на α-глюкозидазата беше количествено определена. Базовата стойност на всеки донор беше предварително определена и считана за 100%, която трябва да бъде сравнена със стойностите, получени от пробите, към които е добавен -химотрипсин.

Мониторинг на α-глюкозидаза в серийно получени семенни плазмени проби. Серийни проби бяха събрани от 9 пациенти чрез програмата за криоконсервация на сперматозоиди на андрологичната лаборатория, UFRO. Пробите бяха групирани в три групи: № 1 съответстваше на въздържание от 2 дни, № 2 до 4 дни и № 3 до 6 дни от началото, но всички бяха взети последователно, по такъв начин, че между тях, въздържанието винаги е съответствало на 2 дни. Обработката на семенната плазма е както е описано по-горе.

Определяне на референтни стойности. При нормални донори активността на неутралната α-глюкозидазна изоформа е 14,52 до 25,9 µU/ml (= 19,32 µU/ml; SD = 1,13; SEM = 0,16) чрез параметрични методи. Нормалният диапазон варира между 15,85-23,46 µU/ml в случай на непараметрични методи (Фигура 1).

Ефект на протеолитичните ензими. Използването на а-химотрипсин при повишаване на концентрациите от 0,1 до 10 mg/ml не променя значително активността на а-глюкозидазата (Фигура 2). Като се има предвид, че концентрации до 10 пъти нормално препоръчителните (1 mg/ml) са използвани за разтваряне на семенната плазма при пациенти с нарушено втечняване.

Анализът на семенната плазма предоставя важна подкрепа за диагностицирането на различни патологии, които засягат мъжката репродуктивна система 19. Количественото определяне на присъствието на ензима а-глюкозидаза корелира директно с функцията на епидидима. Следователно нивата над референтните стойности биха били пряко свързани с пациенти с инфекция, а ниските нива предполагат обструкция или агенеза на семепровода, със стойности, близки до тези, представени от пациенти с вазектомия. За да се приложи правилно тази техника в клиничната лаборатория, беше необходимо да се определят нормалните референтни стойности на чилийското население. При 50 проби от доброволци с нормален семенна анализ е приложен параметричният статистически метод, който с малък размер на пробата 17 може да бъде приложим за цялата изследвана популация. Резултатите, получени от нормална средна стойност от 19,32 µU/ml (SD = 1,13; SEM = 0,16), бяха много сходни с тези, описани за европейската популация (20 µU/ml) 16 .

Определянето на α-глюкозидаза в семенната плазма осигурява надеждна информация за секреторния статус на епидидима и по-специално замества инвазивните методи за оценка на целостта на транспорта на спермата от епидидима до предната уретра, като изключва или потвърждава обструктивните процеси. По същия начин неговото серийно определяне би могло да бъде важно, за да се знае еволюцията на острите възпалителни процеси, които компрометират пътя на транспортиране на сперматозоидите по отношение на нейния обструктивен ефект или нейното разрешаване след съответната терапия.

Кореспонденция на: Проф. Д-р Raúl Sánchez G, Катедра по предклинични науки, Медицински факултет, Университет на Ла Фронтера; Каре 54-D, Телефон: (45) 325000; Факс: (45) 325777. Имейл: [email protected], Темуко-Чили.

Благодаря

Авторите благодарят на проф. Д-р Med Vet Roberto Matamoros, от UCTEM School of Veterinary Medicine, за ценното му сътрудничество в изданието на английски език.

ПРЕПРАТКИ

1. Iusem N, Pineiro L, Blaquer J, Belocopitow E. Идентифициране на основен секреторен гликопротеин от епидидим на плъх: взаимодействие със сперматозоиди. Biol Reprod 1989; 40: 307-16. [Връзки]

2. Бедфорд Дж. Състоянието и състоянието на човешкия епидидим. Hum Игра 1994; 9: 2187-99. [Връзки]

3. Guerin J. Ben Ali H, Cottinet D, Rollet J. Семинална активност на алфаглюкозидазата като маркер на епидидимална патология при неазооспермични мъже, консултиращи се за безплодие. J Андрология 1990; 11: 240-5. [Връзки]

4. Kalla N, Kaur S, Ujwal N, Mehta U, Joos H, Frick J. Активност на алфаглюкозидазата в епидидима на плъх при различни физиологични условия. Международен. J Андрология 1997; 20: 925. [Връзки]

5. Purvis K, Egdetveit I. Сегментно разпределение на -глюкозидаза, орнитин декарбоксилаза и полиамини в човешкия епидидим. J Reprod Плодовитост 1993; 97: 575-80. [Връзки]

6. Castellón E, Huidobro C. Андрогенно регулиране на секрецията на глюкозидаза в епителни клетъчни култури от човешки епидидимис. Hum Игра 1999; 14: 1522-7. [Връзки]

7. Tremblay R, Chapdeline P, Maihot J. a -1,4-глюкозидазна активност в човешка сперма: вариации с броя и подвижността на сперматозоидите. Плодовитост и стерилност 1979; 31: 592-3. [Връзки]

8. Paquin R, Chapdelaine R, Dubé J, Trembay R. Подобни биохимични свойства на човешката семенна плазма и епидидимална -1,4-глюкозидаза. J Андрология 1984; 5: 277-82. [Връзки]

9. Cooper T, Yeung C, Nashan D, Jockenhövel F, Nieschlag E. Подобряване на оценката на човешката епидидимална функция чрез използване на инхибитори в анализа на алфа-глюкозидазата в семенната плазма. Международен J Андрология 1990; 13: 297-305. [Връзки]

10. Sandoval L, Díaz M, Rivas F. a -1,4- глюкозидазна активност и наличие на зародишен епител в спермата за диференциална диагностика на обструктивна и необструктивна азооспермия. Арх андрология деветнадесет и деветдесет и пет; 35: 155-8. [Връзки]

11. Spiessens C, D 'Hooghe T. Wouters E, Meuleman C, Vanderschueren D. a -глюкозидазна активност в семенната плазма: предсказване на валеу за резултат вътрематочна инсеминация и ин витро оплождане. Плодороден стерил 1998; 69: 735-9. [Връзки]

12. Krause W, Bohring C. Защо определяме активността на -глюкозидазата в човешката сперма по време на обработката на безплодието?. Андрология 1999; 31: 289-94. [Връзки]

13. Ludwig M, Kummel C, Schroeder-Printzen R-H, Weidner W. Оценка на параметъра на семенната плазма при пациенти с хроничен простатит или левкоцитосперния. Андрология 1998; 30: 41-7. [Връзки]

14. Peña P, Risopatrón J, Bizama R, Jorquera C, Henkel R, Miska W, Sánchez R. Количествено определяне на алфа глюкозидаза без киселинна изоформа при безплодни пациенти. Влияние на възпалението в репродуктивния тракт на мъжете. Плодороден стерил 1998; 70 (Доп.) 1: R-497. [Връзки]

15. КОЙ. Лабораторно ръководство за изследване на взаимодействията на човешка сперма и сперма-цервикална слуз. Cambridge University Press, 1992 г. [Връзки]

16. Chapdelaine P, Tremblay R, Dubé J. P-нитрофенил-Dglucopyranoside като субстрат за измерване на активността на малтазата в човешката сперма. Клинична химия 1978; 24: 208-11. [Връзки]

17. Хенри R, Cannon D, Winkelman J. Клинична химия, основи и техники. Том I, 2-ро издание. Барселона: Редакционни джимове, 1980; 35365. [Връзки]

18. Кьон, Юнг, Пфлигер-Брус, Еберл, Шил, Шупе, Хофман. Das Spermiogramm, Praktische Anleitungen. Zentrum fúr Dermatologie und Andrologie; Arbeitsgruppe Medizinasubildung. Justus-Liebig-Universitat Giessen. Gaffkystrasse 14, 35385 Giessen. CD-ROM, (c) 1998. [Връзки]

19. КОЙ. В Rowe PJ, Comhaire FH, Hargreave TB и Mellows HJ (eds.) Наръчник за стандартизирано изследване и диагностика на безплодната двойка. Cambridge University press, Cambridge, UK. 1993. [Връзки]

20. Zöpfgen A, Priem F, Sudhoff F, Jung K, Lenk S, Loening SA, Sinha P. Връзка между качеството на спермата и семенните плазмени компоненти карнитин, a-глюкозидаза, фруктоза, цитрат и гранулоцитна еластаза при безплодни мъже в сравнение с нормално население. Hum Игра 2000; 15: 840-5. [Връзки]

21. Sanchez R. Peña P, Miska W, Henkel R. Определяне на променливостта в кондензацията на сперматозоиден хроматин и семенна α-глюкозидаза по отношение на спермиограмата. Rev Méd Чили 2000; 128: 483-489. [Връзки]

Цялото съдържание на това списание, с изключение на случаите, когато е идентифицирано, е под лиценз Creative Commons

Бернарда Морин 488, Провиденсия,
Клетка 168, поща 55
Сантяго, Чили

Тел .: (56-2) 2753 5520


[email protected]