CENTRO DE INVESTIGACIONES BIOLÓGICAS DEL NOROESTE, SC Програма за следдипломно обучение Значение на липидите при възпроизводството и онтогенезата на бялата риба на Pátzcuaro THESIS Какво да придобиете степента на магистър по наука Използване, управление и опазване на природните ресурси (Ориентация в: Аквакултура) представя Бенджамин Апарисио Симон Ла Пас, BCS, ноември 2004 г.

програма

Магистърска теза в използването, управлението и опазването на природните ресурси с ориентация в аквакултурата. УЧЕБЕН КОМИТЕТ Д-р Елена Паласиос Мечетнов Д-р Илие С. Ракота Димитров Д-р Берта Оливия Арреондо Вега КОМИТЕТ ЗА РАЗГЛЕЖДАНЕ Д-р Елена Паласиос Мечетнов Д-р Илие С. Ракота Димитров Д-р Берта Оливия Арредондо Вега ДЪРЖАВНО ИЗСЛЕДВАНЕ ЖУРИ Д-р Дранов Паласиос Ilie S. Racotta Dimitrov д-р Bertha Olivia Arredondo Vega д-р Vicente Gracia López (заместник)

функции. Освен това задържането на ARA е по-високо при култивираните организми, отколкото при дивите, което предполага, че при справяне с дефицита на ARA действа регулаторен механизъм за неговото запазване. Не са открити значими корелации между някои незаменими мастни киселини и техните предшественици на мастни киселини в яйца на диви или култивирани риби, което показва, че ларвите не представят механизми на удължаване и обезмасляване за производство на силно ненаситени мастни киселини (ARA, EPA и DHA), тъй като не разполагат с ензимен механизъм, необходим на този етап или защото първоначалните нива са били достатъчно високи, поне в ранните етапи. Независимо от това, в напреднали стадии, хранени с Artemia, се наблюдават много ниски нива на DHA, което отразява липсата на тази мастна киселина в диетата. Резултатите имат практически последици за хранителните нужди на подплода и ларвите на бялата риба: (1) Вероятно е необходимо да се добави ARA в култивираната подложка и получените ларви; (2) Трябва да се дефинира необходимостта от добавки с DHA в напреднали стадии на ларвите.

ПОСВЕТЕНИЯ На жена ми и сина ми, че винаги са били до мен, че са ме научили и са научили толкова много неща заедно, с цялата ми любов. ANGÉLICA PÉREZ JUÁREZ И SAMUEL IAÍN APARICIO PÉREZ На моите баби и дядовци, чиято мотивация беше решаваща за продължаване напред OFELIA OCHOA И ROLANDO APARICIO/TECLA ZAMORA AND FERNANDO SIMÓN На моите родители за големите усилия и мотивация, като ме подкрепиха безусловно в своите решения SIMÓN ZAMORA И JUAN APARICIO OCHOA На моите братя, от които винаги съм получавал тяхната безценна подкрепа и обич DIANA AIDA, NORA TONANTZÌN И JUAN На моето семейство за голямата подкрепа и мотивация, които по един или друг начин вдъхнаха доверие и сигурност в себе си. APARICIO СЕМЕЙСТВО НА OCHOA, SIMÓN APARICIO И PÉREZ JUÁREZ В памет на онзи, който ми е внушил истински ценности и на когото с неговия пример се научих винаги да гледам напред ROLANDO APARICIO ALCAUTER

Ако вратите на възприятието бяха пречистени, всичко би изглеждало на хората така, както е в действителност: безкрайно. Защото човек се е затворил в себе си, докато не види всички неща през тесните пукнатини на пещерата си Уилям Блейк

Бенджамин Апарисио Симон Общ индекс ОБЩ ИНДЕКС Резюме Резюме 1. Въведение 1 2. Контекст 5 2.1. Липиди и мастни киселини: структура и номенклатура 5 2.2. Класове мастни киселини и липиди. 6 2.3. Незаменими мастни киселини: сладководни vs. морски 12 3. Обосновка 16 4. Хипотеза 18 5. Цели 19 6. Материал и методи 20 6.1. Предварителни тестове 20 6.2. Първо проучване: Тъкани от диви животни 20 6.3. Второ проучване: Онтогения на диви и културни растения 21 6.3.1. Размножаване на култивирани организми 21 6.3.2. Размножаване на диви организми 22 a. Вземане на проби от яйца и ембриони 23 6.3.3. Култура на личинки и жива храна 24 a. Получаване на ларви 25 6.3.4. Определяне на мастни киселини чрез газова хроматография 26 6.3.5. Определяне на липидните класове чрез Iatroscan 27 6.3.6. Вземане на проби и състав на мастни киселини в храната 28 7. Статистически анализ 31 8. Резултати 32 8.1. Първо проучване: Тъкани от риби с диво пило 32 8.1. да се. Мозък 32 8.1. б. Гонада 35 8.1. ° С. Черен дроб 38 8.1. д. Мускул 41 8.1. и. Мастна тъкан 44

Общ индекс на Бенджамин Апарисио Симон 8.2. Второ проучване: Ембрионално и ларвно развитие 47 8.2.1. Разлики между диви и култивирани 47 a. Мастни киселини в неутралната фракция 58 b. Мастни киселини в полярната фракция 50 8.2.2. Развитие на личинки на култивирани организми 55 a. Мастни киселини в неутралната фракция 55 b. Мастни киселини в полярната фракция 55 8.2.3. Вариация на липидите по време на развитието 60 8.2.4. Корелации между незаменими мастни киселини 64 9. Дискусия 67 9.1. Мастни киселини в диетата и тяхното влияние върху разплода на сиг 67 9.2. Състав на мастните киселини в тъканите 72 9.2.1. Разлики между половете 78 9.3. Липиден състав в яйца 82 9.4. Динамика на липидите по време на развитие 89 9.5. Синтез по време на лецитотрофия 93 9.6. Влияние на диетата върху култивирани ларви 95 10. Заключения 99 11. Позовавания 101 12. Приложения 115 12.1. ПРИЛОЖЕНИЕ А: Таксономично местоположение на бялата риба 116 12.2. ПРИЛОЖЕНИЕ Б: Култура на жива храна (Artemia sp.) 117 12.3. ПРИЛОЖЕНИЕ В: Култура на ларви на бяла риба 118 12.4. ПРИЛОЖЕНИЕ Г: Анализ на мастни киселини 119

Бенджамин Апарисио Симон Съкращения СЪКРАЩЕНИЯ (22: 6/20: 5): съотношение на DHA (22: 6n-3) и EPA (20: 5n-3) (n-3/n-6): съотношение на мастни киселини в серия n-3 и серия n-6. ARA: арахидонова киселина BHT: цис бутилхидрокситолуен: цис конфигурация на мастна киселина DG: диглицериди DHA: докозахексаенова киселина DMA: диметилацетал EPA: ейкозапентаенова киселина MG: моноглицериди PL: фосфолипиди psu: практически единици на солеността Индекс на Saturation: индекс на насищане G триглицериди: транс конфигурация на мастна киселина Σ DMA: сума на диметилацетал Σ HUFA: сума на силно ненаситени мастни киселини (4 или повече двойни връзки) Σ MUFA: сума на мононенаситени мастни киселини Σ PUFA: сума на полиненаситени мастни киселини (2 или повече двойни връзки) Σ SAT: сума на наситени мастни киселини

Benjamín Aparicio Simón Въведение 4 и по-добър растеж, основан особено на хранителните нужди на този вид.

Benjamín Aparicio Simón Background 9 причинява повишаване на кортизола и това може да доведе до по-висока смъртност, ако тялото е подложено на хроничен стрес (Bell and Sargent 2003).

Бенджамин Апарисио Симон Фон 13 18: 2 (n-6) 18: 3 (n-6) 20: 3 (n-6) 20: 4 (n-6) 18: 3 (n-3) 18: 4 (n -3) 22: 4 (n-6) 22: 5 (n-6) ЕЛАНГИИ НА МАЗНИ КИСЕЛИНИ 20: 4 (n-3) 20: 5 (n-3) 18: 1 (n-9) 18: 2 (n-9) 22: 5 (n-3) 22: 6 (n-3) 20: 2 (n-9) 20: 3 (n-9) DELTA-6- DESATUREASE DELTAS-5- DESATUREASE DELTA-4 - ОТЧАСТИЕТО? Фигура 2. - Удължаване и десатурация на ненаситени мастни киселини (Взето от Sargent et al., 1995). Друга причина за разликите между различните риби може да се дължи на хранителните навици на различните видове, като се има предвид, че рибите с месоядни навици имат по-голямо количество мастни киселини от 20 и 22 въглерода, докато тези с навици или тревопасни животни имат по-голямо количество киселини.18-въглеродни мастни киселини (Sargent, 1995). Освен това морските организми, които се използват като източник на храна за риби, натрупват по-високи нива на HUFA от сладководните организми, предвид солеността на морската вода, а понякога и при ниските температури, при които някои видове обитават (Whitney, 1974; Morris et al. 1982; Leray et al., 1984; Dawes et al., 1993; Navarro et al., 1993b, Lee et al., 1989; Tocher et al., 1995, Farkas et al., 2000). В резултат на това рибите, които се хранят с водорасли или зоопланктон от морски произход, имат по-голямо естествено снабдяване с HUFA, така че не е необходимо да синтезират тези мастни киселини.

Бенджамин Апарисио Симон Предистория 15 цел да установи хранителните нужди на тези компоненти и да може да формулира адекватни диети за оптимизиране на тяхното отглеждане.

Benjamín Aparicio Simón Обосновка 17 различни контекста: 1) анализ на състава на мастните киселини в различни тъкани на диви жени и мъже през репродуктивния сезон, който позволява да се визуализира дали има диференциална мобилизация между жени и мъже от резервни тъкани (мастна тъкан и черен дроб, главно) към половата жлеза и 2) анализ на изменението на мастните киселини през онтогенезата от хвърлянето на хайвера на диви и култивирани организми, което ще позволи да се установи дали има някои недостатъци в случай на култивирани организми, както и как да се наблюдават процесите на използване, синтез или консервиране на различните мастни киселини.

Бенджамин Апарисио Симон Цели 19 5. ЦЕЛИ Общи Да се ​​анализира състава на липидите при възрастни, яйца, ембриони и ларви на бяла риба, за да се установят основите на хранителните нужди на липидите по време на развитието на ларвите на бялата риба на Pátzcuaro ( Хиростома сляп). Данни Определете концентрацията и състава на мастните киселини в различните тъкани на разплод от бяла риба. Определете концентрацията и състава на мастните киселини и липидите през различните етапи от ембрионалното и ларвното развитие на бялата риба.

Benjamín Aparicio Simón Материали и методи 20 6. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИ 6.1. Предварителни тестове В предварителен тест беше дефинирана методологията за вземане на проби от яйца на бяла риба, ембриони и ларви. Беше определено, че минималното количество проба, необходимо за извършване на определянето на мастните киселини, е 30 до 50 mg тегло на яйца или ларви за всеки от седемте етапа, които трябва да бъдат разгледани. Получава се средното тегло на яйца, ембриони и ларви на всеки етап, за да се знае колко индивида трябва да бъдат получени при всяко вземане на проби. 6.2. Първо проучване: Тъкани на диви репродуктори Възрастните организми (5 женски и 5 мъжки) бяха уловени през март с помощта на хамак в езерото Пацкуаро от търговски риболовни организми (Barriga-Tovar, 2000) и прехвърлени на лед в съоръженията на INIRENA. Там се извършва дисекция, за да се получат проби от черен дроб, мускули, мозък, полова жлеза и мастна тъкан, които са замразени при 70 ° С за последващия им анализ на мастните киселини. В езерото са взети и проби от планктон за анализ на мастни киселини, чиито пропорции (%) са показани в таблица IV.