тежките

  • Субекти
  • Обобщение
  • Въведение
  • Резултати
  • JNJ-26481585 показва продължителна активност и повишава нивата на SMN протеин в първичните клетъчни линии на фибробластите на пациента при дози с ниска токсичност
  • JNJ-26481585 леко подобрява двигателния и тегловния фенотип на мишки със SMA, но не може да преодолее преждевременната смърт при тези животни
  • JNJ-26481585 показва положителна регулация на нивата на SMN протеин in vivo
  • SMA мишките показват забележими аномалии в множество органи, дори преди да станат очевидни двигателните дефицити
  • NMJ дефектите в мускулите на TVA се подобряват след лечение с JNJ-26481585 при животни с късен стадий SMA
  • Васкулатурата на скелетните мускули е силно засегната и не показва значително подобрение след лечение с JNJ-26481585 при животни с SMA в ранен стадий
  • Дискусия
  • Допълнителна информация
  • Word документи
  • Допълнителна информация

Субекти

  • Медикаментозна терапия
  • Заболявания на гръбначния мозък

Обобщение

Въведение

В настоящата работа ние изучаваме пан-HDACi JNJ-26481585, който понастоящем е обект на множество фази I и II антинеопластични клинични проучвания (//www.clinicaltrials.gov/ct2/results?term=JNJ-26481585). 36, 37 JNJ-26481585 е производно на хидроксамова киселина, химически свързано с LBH589, което е най-мощният HDACi при повишаване на регулацията на SMN протеин в човешки пациентски фибробластни клетъчни линии, изследвани досега. 26 Подобреният фармакологичен профил и увеличеният полуживот на JNJ-26481585 в сравнение с LBH589 ни накара да тестваме това съединение in vitro и in vivo за неговата полза при SMA. 38, 39

За in vivo анализ използвахме тежък SMA модел на мишка, разработен от тайванска група. 40 Ефективна схема за размножаване (Smn -/-; SMN2 tg/tg X Smn +/−), разработена в нашата лаборатория, доведе до 50% от всяко котило, развиващо SMA (Smn -/-; SMN2 tg/0) със средна преживяемост ∼ 10 дни в чист фон BVF/N. Останалите 50% са здрави носители на SMA (Smn +/-; SMN2 tg/0) и се използват като контроли. 30

Резултати

JNJ-26481585 показва продължителна активност и повишава нивата на SMN протеин в първичните фибробластни клетъчни линии на пациента при дози с ниска токсичност

Подобряване на двигателните характеристики и прогресията на теглото при животни със SMA, лекувани с JNJ-26481585. ( да се ) Нелекувани (= Естествена история = NH) Животните със SMA спират в прогресията на теглото си около P5, докато третираните животни продължават да наддават до P9 със значителни разлики между P8 и P10. ( б ) Нелекуваните SMA NH животни показват бързо намаляване на резултатите от теста с епруветка. Животните, третирани с JNJ-26481585, поддържат двигателна ефективност до P9; N = 19 (нелекувано), N = 18 (обработено с JNJ-26481585). Стойностите показват средна стойност ± SD, ** = P

Хистология на белите дробове, червата и сърцето на животни със SMA в сравнение с контролните котила при P5 и P8. ( ДА СЕ ) Мишките при P5 и P8 разкриват подобни лезии с различна степен на тежест. Животните с SMA (c, g) показват различна степен на емфизем с разкъсани алвеоларни прегради и увеличени алвеоларни пространства в сравнение с контролните животни (a, e). Тънките черва разкриват намален брой вили, а вилите са тъпи и с форма на клуб с тежък интрамурален оток в ламина проприа на животни със SMA (върхове на стрелки в d, h). Епителните клетки на лигавицата показват интрацитоплазмени вакуоли предимно по върховете на ворсите и млечните клетки от време на време се разширяват (стрелки на d, h). Тези лезии липсват при контролите на същата възраст (b, f). Промените бяха очевидни при P5 и показват прогресия към P8. Мащабна лента 100 μm. ( Б. ) Представителни изображения на контролни сърца и SMA животни при P5 и P8. Камерните прегради изглеждат изтънени при животни със SMA.

Изображение в пълен размер

NMJ дефектите в мускулите на TVA се подобряват след лечение с JNJ-26481585 при животни с късен стадий SMA

TVA е мускул, за който е известно, че е силно засегнат при миши модели на SMA и невромускулни нарушения. 49 Изследвахме препаратите на TVA от SMA и контролирахме отпадъците при P0, P5 и P8, за да оценим кога дефектите на NMJ стават очевидни. Размерът на крайната NMJ плака от TVA започва да изостава при P5 в SMA в сравнение с контролните животни (Фигури 5a, c и d). При P8 наблюдавахме значителни разлики в размера на крайната NMJ плоча (176 срещу 106 μm; Фигури 5а и д). Средният размер на крайната плоча при P8 при SMA животни е по-малък, отколкото при ранните симптоматични P5 животни (130 μm), което предполага истинска атрофия, а не ефекти върху размера поради намален растеж. Животните, третирани с JNJ-26481585, не показват значителни разлики в размера на крайната плоча в P5 и крайните плочи са значително по-големи при третираните P8 животни, отколкото при нетретираните (Фигури 5b, d и e).

Масивната ацидоза предлага обяснение или може да допринесе за много от наблюдаваните състояния. Изглежда, че белият дроб е засегнат в ранните стадии на заболяването при животни със SMA. Дихателната недостатъчност може да доведе до прогресивна ацидоза, водеща до декомпенсация на множество органи, включително чревната подкожна тъкан под формата на оток и стрес върху сърцето. Може да настъпи бърза смърт. Бъдещите проучвания трябва да изяснят дали тази хипотетична верига от катаклизми може да е отговорна за бързото прогресиране на заболяването, наблюдавано в нашия и други модели на SMA. Също така ще бъде интересно да се характеризира допълнително сложното взаимодействие между изчерпването на SMN, патологията на органите и прогресирането на заболяването в различни крайни органи и различни стадии на заболяването.

В обобщение, многократно е доказано, че лечението с HDACi е полезно при миши модели на SMA. Въпреки че е възможна по-голяма полза за по-леко засегнатите SMA модели, ефектите от тествания HDACi JNJ-26481585 не могат да преодолеят патологията, наблюдавана при нашите силно засегнати животни. Фенотипните особености, открити в това проучване, заедно с други нововъзникващи доклади, дават силна улика за възможното първично или вторично засягане на органи, за които преди се е смятало, че не са засегнати поне в началото на това заболяване. Констатациите, описани тук, се нуждаят от допълнително потвърждение и характеризиране и при други SMA модели на мишки, за да се установи дали те представляват неразделна част от фенотипа. По-доброто разбиране на органното засягане в крайна сметка може да доведе до по-добро ниво на грижа чрез по-внимателно наблюдение на пациентите с SMA по отношение на развитието на съответната патология и ранна интервенция.