Текстът завършен

(1) ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO НАУЧЕН ФАКУЛТЕТ УЧИЛИЩЕ ПО БИОХИМИЯ И ФАРМАЦИЯ. "ПРОВЕРКА НА ОТСЛАБЛЯВАЩИЯ ЕФЕКТ НА ТИНКТУРА НА ГВАЮСА (Ilex guayusa) ПРИ МИШКИ (Mus musculus) С ИНДУКЦИОННА НАДЪРЖАВАЩА ТЕГЛА". СТЕПЕН НА ТЕЗАТА ПРЕДИ ПОЛУЧАВАНЕТО НА СТЕПЕНТА НА. ФАРМАЦЕВТИЧНИ БИОХИМИЧНИ ПРЕДСТАВЕНИ ОТ:. АНА ГАБРИЕЛА ПАЧА ДЖАРА РИОБАМБА - ЕКВАДОР. 2012 г.

тинктурата

(2) ПОСВЕТЕНИЕ На Бог и на родителите ми Луис и Елиса с много любов и обич, тъй като те са основният стълб в живота ми и безусловната ми подкрепа по всяко време за постигане на всичките ми цели. На майка ми Флора за това, че е част от живота ми и че се грижи за мен. На моите братя, Дарио, Евелин, Дженет, Маури и Густаво, че ме подкрепяха по всяко време. битие. моя приятели. Y. съветници. На племенника ми Едисон, че беше моята радост . моя.

(3) БЛАГОДАРЯ на Бог, че ми е дал съществуване и е моята сила. в. на. моменти. плюс. твърд,. като по този начин ми позволи да стигна до края на състезанието. Да се. Училище. По-висок. Политехнически. на. Chimborazo за академичното обучение, което ми даде. До Дра. Сусана Абдо и Bqf. Фаусто Контеро, които са ръководили провеждането на това изследване през цялото време. Al Bqf. Диего Винуеза и д-р Карлос Пиламунга за тяхното ценно сътрудничество и съвети при изпълнението на тази теза. На цялото ми семейство за безусловната им подкрепа. На моите приятели, че винаги са ме подкрепяли и са ми предлагали своето искрено приятелство.

(4) ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO НАУЧЕН ФАКУЛТЕТ УЧИЛИЩЕ ПО БИОХИМИЯ И ФАРМАЦИЯ Дисертационният съд удостоверява, че: Изследователската работа: „ПРОВЕРКА НА ОТСЛАБЛЯВАЩИЯ ЕФЕКТ НА ТИНКТУРАТА ГВАЮЗА) (Ilex guayusa) МИШКИ. (Mus. Musculus). С. НАДНОРМЕНО ТЕГЛО. ИНДУЦИРАНИ",. на. отговорността на завършилата Ана Габриела Пача Джара, е внимателно прегледана от членовете на дисертационния съд и представянето му е разрешено. ПОДПИС. Д-р Силвио Алварес. ДАТА. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. __________________. _______________. DEAN FAC. НАУКИ. Д-р Иван Рамос ДИРЕКТОР НА УЧИЛИЩЕТО. Дра Сусана Абдо РЕЖИСОР НА ТЕЗАТА. Bqf. Fausto Contero ЧЛЕН НА СЪДА. Atty. ДИРЕКТОР ЦЕНТЪР ЗА ДОКУМЕНТАЦИЯ Карлос Родригес. ПИСМЕНА БЕЛЕЖКА ЗА ТЕЗАТА. ______________________.

(5) Аз, Ана Габриела Пача Джара, отговарям за идеите, доктрините и резултатите, представени в тази теза; и интелектуалното наследство на дипломната работа принадлежи на ПОЛИТЕКНИКА ВЪРШЕНО УЧИЛИЩЕ В ЧИМБОРАЗО. ________________________________________ АНА ГАБРИЕЛА ПАЧА ДЖАРА.

(6) ИНДЕКС НА СЪКРАЩЕНИЯТА *. Статистически значима разлика. ° С Градуса по Целзий. µg. микрограма. μL. микролитър. Б . Бацил. см. сантиметър. LD50 Средна летална доза Е . Ешерихия. ЕО. Бульон за ешерихия коли. ж. грам. HPLC високоефективна хроматография кг, килограм. Л. Литър. L-B. Либерман-Бухард. m.sn.m метра над морското равнище мин. минута. mg милиграм. мл. милилитър. Н.А. Не е приложимо. нм. нанометър. MPN Най-вероятният брой ppm. Част на милион. Pr. A. Тест за горчиви UV лъчи. Ултравиолетово. i.

(7) ИНДЕКСИ. ИНДЕКС НА СЪКРАЩЕНИЯТА. x ОБЩИ ИНДЕКСИ. xivi ИНДЕКС НА ТАБЛИЦИТЕ. xiii ИНДЕКС НА ТАБЛИЦИТЕ. xiv ИНДЕКС НА ФИГУРИТЕ. xx ИНДЕКС НА ФИГУРИТЕ. xxi ИНДЕКС НА СНИМКИ. xivii ИНДЕКС НА ПРИЛОЖЕНИЯТА. xxiii ВЪВЕДЕНИЕ. ГЛАВА I. 1 1 . ТЕОРЕТИЧНА РАМКА. 1. 1.1. Наднормено тегло и затлъстяване. 1. 1.1.1. Определение. 1. 1.1.2. Класификация. 2. 1.1.2.1. Според излишното телесно тегло. 2. 1.1.2.2. Според разпределението на телесната маса. 2. 1.1.3. Рискови фактори . 3. 1.1.4. Коморбидни фактори, свързани със затлъстяването. 4. 1.1.5. Механизми за контрол на апетита и телесното тегло. 5 ii.

(8) 1.1.6. Лечение на затлъстяване и наднормено тегло. 5. 1.1.6.1. Основно лечение. 5. 1.1.6.2. Фармакотерапия. 5. 1.1.6.2.1 Лекарства, потискащи апетита. 7 1.1.6.2.2 Лекарства, модулиращи абсорбцията на хранителни вещества. 1.1.6.2.3 Лекарства, които стимулират термогенезата. 1.1.6.3. Хирургично лечение на затлъстяването. 11. 1.2. Растения за отслабване. 12. 1.2.1. Концепция. 12. 1.2.2. Растения с термогенна активност. 12. 1.2.2.1. Зелен чай (Camellia sinensis). 12. 1.2.2.2. Мате (Ilex paraguariensis). 13. 1.2.2.3. Гуарана (Paullinia cupana). 14. 1.2.3. Намаляващи апетита лечебни растения. 14. 1.2.3.1. Худия (Hoodia gordinii и Hoodia pilifera). 14. 1.2.3.2. Горчив портокал (Citrus aurantium). 15. 1.2.4. Растения с диуретична активност. 15. 1.2.4.1. Ортосифон (Ortosiphon stamineus). 15. 1.2.4.2. Хвощ (Equisetum arvense). 16. 1.2.4.3. Артишок (Cynaras colimus). 16. 1.2.5. Инхибиращи растения на липогенезата. 17. 1.2.5.1. Гарциния (Garcinia cambogia). 17. 1.2.6. Наситени и редуциращи растенията растения. 17. 1.2.6.1. Глюкоманан. 17. 1.2.6.2. Плантаго (Plantago spp.) ………………… . ……………… . ………………. 18. 1.2.6.3. Fuco (Fucus spp.). 18 iii.

(9) 1.2.6.4. Боб (Phaseolus vulgaris). 19. 1.2.6.5. Гимнама (Gymnema sylvestre). 19. 1.3. Гуаюса. 19. 1.3.1. Концепция. 19. 1.3.2. Ботаническо описание. 20. 1.3.3. Таксономични данни. 20. 1.3.4. Морфологични данни. 20. 1.3.4.1. Често срещано име . 20. 1.3.4.2. Среда на живот. 20. 1.3.4.3. Размер на вида. 20. 1.3.4.4. Багажник. 20. 1.3.4.5. Листа. 21. 1.3.4.6. Цвете. 21. 1.3.4.7. Плодове 21. 1.3.5. Медицинска употреба. 22. 1.3.6. Основни компоненти на Ilex guayusa. 22. 1.3.7. Култура и традиции. 24. 1.4. Кофеин 24. 1.4.1. Концепция. 25. 1.4.2. История. 27. 1.4.3. В природата и синтетични продукти. 30. 1.4.4. Химични свойства. 31. 1.4.5. Фармакология. 31. 1.4.6. Метаболизъм и полуживот. 33. 1.4.7. Механизъм на действие. 35. 1.4.8. Лечебни свойства на кофеина. 37 iv.

(10) 1.4.9. Кофеиновият и мастният метаболизъм. 37. 1.4.10. Метаболизмът на кофеина. 38. 1.4.11. Чувствителност към кофеин 39. 1.4.12. Непосредствени ефекти на кофеина. 39. 1.4.13. Кофеин и здраве. 39. 1.4.14. Безопасно дозиране. 40. 1.4.15. Кофеиновите странични ефекти и предпазни мерки. 40. 1.5. Експериментални животни. 41. 1.5.1. Мишка (Mus musculus). 41. 1.5.1.1. Таксономия 41. 1.5.1.2. Предимства на използването му като лабораторно животно. 41. 1.5.1.3. Недостатъци. 41. 1.5.1.4. Основни характеристики . 42. 1.5.1.5. Поведение на мишката. 43. 1.6. Тинктура 45. ГЛАВА II. 45 2 . ЕКСПЕРИМЕНТАЛНА ЧАСТ. 45. 2.1. Местоположение на изследването. 45. 2.2. Материали, оборудване и реактиви. 47. 2.2.1. Биологичен материал. 47. 2.2.2. Лабораторни материали. 49. 2.2.3. Оборудване. 49. 2.2.4. Реактиви 49. 2.3. Техники и методи. 49. 2.3.1. Контрол на качеството на суровите лекарства. 50. 2.3.1.1. Определяне съдържанието на влага. 52v.

(11) 2.3.1.2. Определяне на общата пепел. 52. 2.3.1.3. Определяне на водоразтворимата пепел. 52. 2.3.1.4. Определяне на пепел, неразтворима в солна киселина. 53. 2.3.1.5. Фитохимичен скрининг. 54. 2.3.1.5.1 Процес в Судан. 54 2.3.1.5.2 Тест на Baljet. 55 2.3.1.5.3 Тест на Либерман-Бухарт. 55 2.3.1.5.4 Тест за Драгендорф. 56 2.3.1.5.5 Тест на Майер. 56 2.3.1.5.6 Тест на Вагнер. 56 2.3.1.5.7 Изпитване на смола. 56 2.3.1.5.8 Тест на Фелинг. 56 2.3.1.5.9 Изпитване на пяна. 57 2.3.1.5.10 Анализ на железен хлорид (FeCl3). 57 2.3.1.5.11 Анализ на нинхидрин. 57 2.3.1.5.12 Анализ на Borntrager. 58 2.3.1.5.13 Тест за Шинода. 58 2.3.1.5.14 Тест на Kedde. 58 2.3.1.5.15 Анализ на антоцианидин. 59 2.3.1.5.16 Анализ на слуз. 59 2.3.1.5.17 Катехинов анализ. 59 2.3.1.5.18 Тест на горчиви принципи. 59 2.3.2. Приготвяне на тинктурата на гуаюса (Ilex guayusa). 60. 2.3.3. Контрол на качеството на тинктурата на гуаюса. 60. 2.3.3.1. Органолептично определяне на хидроалкохолния екстракт. 60. 2.3.3.2. Определяне на физико-химичните параметри на багрилото. 60 трион.

(12) 2.3.3.2.1 Определяне на показателя на пречупване. 61 2.3.3.2.2 Определяне на относителната плътност. 62 2.3.3.2.3 Определяне на pH. 63 2.3.3.3. Определяне на замърсяващи микроорганизми. 63. 2.3.3.3.1 Метод за отчитане на общите мезофилни аероби на плочата. 63 2.3.3.3.2 Определяне на общите колиформи. 65 2.3.3.3.3 Определяне на фекални колиформи. 65 2.3.3.3.4 Метод за броене на форми за плочи. 66 2.3.4. Екстракция на кофеин. 67. 2.3.5. Екстракция на общи алкалоиди. 68. 2.3.6. Анализ. хроматографски. на. Високо. ефективност. (HPLC). на кофеин. извлечен ……………………………………………………………………… .69 2.3.7. UV спектрофотометричен анализ на извлечения кофеин. 70. 2.3.8. Тънкослоен хроматографски анализ на извлечения кофеин (TLC). 71. 2.3.9. Активност за отслабване на guayusa (Ilex guayusa). 71. ГЛАВА III. 73 3 . Резултати и дискусия. 73. 3.1. Контрол на качеството на суровите лекарства. 73. 3.1.1. Определяне на влажността. 74. 3.1.2. Определяне на общата пепел. 75. 3.1.3. Определяне на водоразтворимата пепел. 75. 3.1.4. Определяне на пепел, неразтворима в солна киселина. 75. 3.1.5. Фитохимичен скрининг. 76. 3.2. Контрол на качеството на тинктурата на гуаюса (Ilex guayusa). 76. 3.2.1. Органолептично определяне на хидроалкохолния екстракт. 76. 3.2.2. Определяне на физико-химичните параметри на багрилото. 77 vii.

(13) 3.2.3. Количествено определяне на кофеина в багрилото чрез хроматографски анализ с ефективност (HPLC). 78. 3.2.4. Определяне на замърсяващи микроорганизми. 79. 3.3. Екстракция на кофеин. 79. 3.3.1. Тънкослоен хроматографски анализ (TLC) на извлечения кофеин. 80. 3.3.2. UV спектрофотометричен анализ на извлечения кофеин. 81. 3.3.3. Анализ на високоефективна течна хроматография (HPLC) на извлечения кофеин ……………………………………………………………………… .82. 3.4. Активност за отслабване на тинктура от гуаюса (Ilex guayusa). 83. ГЛАВА IV. 89 4 . Заключения. 89. ГЛАВА V. 91 5 . Препоръки. 91. ГЛАВА VI. 92 6 . Резюме и обобщение. 92. ГЛАВА VII. 94 7 . Библиография. 94. ГЛАВА VIII. 104 8 . Приложения ……………………………. ……………………………………… .104. viii.

(15) ИНДЕКС НА ТАБЛИЦИТЕ. ТАБЛИЦА № 1. Клинична класификация на затлъстяването ……………………. ……… . 2. ТАБЛИЦА № 2. Обиколката на талията/риск от метаболитна патология….…. 3. ТАБЛИЦА № 3. Основни заболявания, свързани със затлъстяването ………………. 4. ТАБЛИЦА № 4. Идеални характеристики на лекарство за лечение на затлъстяване …………………………… . ………………… . ………… . 6. ТАБЛИЦА № 5. Съдържание на кофеин в някои храни и наркотици…. …… .…. 29. ТАБЛИЦА № 6. Таксономия на експерименталните животни, използвани във фармакологичното проучване ……………………………………… . …… . 46. ТАБЛИЦА № 7. Анатомично описание ……… …… . ……………………………. 46. ​​ТАБЛИЦА № 8. Подробности за условията за поддръжка ………… . ……………. 46. ​​ТАБЛИЦА № 9. Тълкуване на MPN за определяне на общите колиформи ................................. 64. ТАБЛИЦА № 10. Описание на експерименталния проект ……………………………. 71. ТАБЛИЦА № 11. Наредби за контрол на качеството на влажността ………….…. 73. ТАБЛИЦА № 12. Наредби за общия контрол на качеството на пепелта ……………. 74. х.

(16) ИНДЕКС НА ГРАФИКИ. ГРАФИКА № 1. Крива на абсорбция спрямо стандартната концентрация на кофеин за количествено определяне на кофеина, извлечен от растението guayusa и търговския чай guayusa… . ………………. ………… . ………… . ГРАФИКА № 2. 81. Крива на вариация на теглото спрямо времето по време на администрирането на леченията ... …… ……. 87. xi.

(17) ИНДЕКС НА ФИГУРИТЕ. ФИГУРА № 1. Структура на кофеина. ……………………… . ……… . …………. 30. ФИГУРА № 2. Метаболизмът на кофеина….… . ……………………… . …………. 31. ФИГУРА № 4. Фитохимичен скрининг ……………………………………………………. 53. xii.

(18) ИНДЕКС НА СНИМКИ. ФОТОГРАФИЯ № 1. Тънкослойни хроматографии на гуаюса (Ilex guayusa) . 80. ФОТОГРАФИЯ № 2. Екстракция на хлороформ в ротационен изпарител ……………….…. 104. ФОТОГРАФИЯ № 3. Кофеинови кристали ………. …………………………….…. 104. ФОТОГРАФИЯ № 4. Анализ за идентифициране на алкалоиди ……. ………. … . 105. ФОТОГРАФИЯ № 5. Тест за идентифициране на общите захари ……………. 105. ФОТОГРАФИЯ № 6. Тест за идентифициране на общите захари ……………. 105. ФОТОГРАФИЯ N ° 7. Муфел …………………. ……………. ……………. ………… . 106. СНИМКА № 8. Ексикатор ………………………………… .…. ………………. 106. ФОТОГРАФИЯ N ° 9. pH-метър ……………………………. ………………………… . 106. ФОТОГРАФИЯ № 10 Спектрофотометър ………………………… … ………………. 106. ФОТОГРАФИЯ № 11 Бяла група …………………………………………………. 107. ФОТОГРАФИЯ № 12 Закачалка с различните учебни групи …………… .…. 107. ФОТОГРАФИЯ № 13 Положителна контролна група ………………………………. ………. 107. xiii.

(19) ИНДЕКС НА ПРИЛОЖЕНИЯТА. ПРИЛОЖЕНИЕ № 1. Екстракция на кофеин ……… . ………………… . ………. 104. ПРИЛОЖЕНИЕ № 2. Фитохимичен скрининг …………… . ………………. …… . 105. ПРИЛОЖЕНИЕ № 3. Използвано оборудване ……. …………………. ………….…. 106. ПРИЛОЖЕНИЕ № 4. Опитни животни …………………………….…. 107. ПРИЛОЖЕНИЕ № 5. Данни за теглото на мишките по време на етапа на угояване .... 108. ПРИЛОЖЕНИЕ № 6. Данни за теглото на мишките по време на етапа на изтъняване. …………………………………………………. ПРИЛОЖЕНИЕ № 7. Доза на прилагане на различните процедури за отслабване ………………………… . ……………………… . ПРИЛОЖЕНИЕ № 8. ПРИЛОЖЕНИЕ № 9 109. 110 Обеми на прилагане на различните процедури за отслабване ………………………………………………………. 111. Кофеинови HPLC хроматограми ………………………. 112. xiv.

(22) Целите бяха да се провери ефектът на отслабване на тинктурата на guayusa (Ilex guayusa) при мишки (Mus musculus) с предизвикано наднормено тегло, в допълнение към наблюдението на този ефект с влиянието на екстракта, богат на алкалоиди на guayusa. Поради тази причина беше включено знанието, че кофеинът е активна съставка, която помага за отслабване и че той присъства в почти всички продукти, които се използват за тази цел. Изследването е проведено в град Риобамба, във Факултета на науките на Висшето политехническо училище в Чимборасо.Следващата цел е да се извърши контрол на качеството на суровото лекарство и това на гуаюса (Ilex guayusa), за да се провери че растението е прибрано правилно и гарантира неговата безопасност за консумация. И като последна цел беше проведено количественото определяне на кофеина на чая и растението гуаюса и ефектът на отслабване на тинктурата на гуаюса беше идентифициран при прилагането му върху мишки с наднормено тегло, индуцирани при различни дози в продължение на три седмици.

(23) -1-. ГЛАВА I. 1. ТЕОРЕТИЧНА РАМКА. 1.1 НАДЪРЖАТЕЛНО ТЕГЛО И ЗАТЪЛВАНЕ 1.1.1 ОПРЕДЕЛЕНИЕ. Наднорменото тегло и затлъстяването се определят като необичайно или прекомерно натрупване на мазнини, които могат да бъдат вредни за здравето. (54). Наднорменото тегло е увеличаване на телесното тегло; Затлъстяването е увеличаване на размера или количеството на мастните клетки, достатъчно да увреди здравето на индивида. От епидемиологична гледна точка се използва изчисляването на индекса на телесна маса (ИТМ) или индекса на Quetelet, който е съотношението между теглото (kg), разделено на височината (в метри) на квадрат (kg/m2). Този индекс корелира много добре с количеството телесни мазнини, въпреки че има определени ограничения като тези, които не отчитат възрастта, пола и ръста като променливи, които да се вземат предвид. В световен мащаб обаче този индекс се използва като най-подходящ за сравнение между различни популации или клинични проучвания. Настоящата класификация на затлъстяването винаги се препраща към ИТМ, където можем лесно да различим субектите с нормално тегло от тези с наднормено тегло и с различна степен на затлъстяване. (16), (62).