Достъп до MediSur:

предизвикване

Индексиране на метаданни

Как да цитирам елемент

Отпечатайте тази статия

Политика за преглед

Стандартизация на модел за предизвикване на затлъстяване при плъхове

Стандартизация на модела за предизвикване на затлъстяване при плъхове

РЕЗЮМЕ

Ключови думи: Плъхове Wistar, натриев глутамат, животински модели, затлъстяване

РЕЗЮМЕ

Ключови думи: Плъхове Wistar, натриев глутамат, модели, животни, затлъстяване

ВЪВЕДЕНИЕ

Затлъстяването се превърна в сериозен проблем за общественото здраве поради нарастващото му разпространение в световен мащаб. Той е основен рисков фактор за множество незаразни хронични заболявания като захарен диабет тип 2, сърдечно-съдови и мозъчно-съдови заболявания, високо кръвно налягане, дислипидемии и някои видове рак. 1

Поради голямото сходство и хомология между гризачите и човешкия геном, тези животински модели са основен инструмент за изследване на болестни състояния, които засягат хората. Затлъстяването при животните може да бъде предизвикано чрез генетична или диетична манипулация или индукция на невроендокринни промени. Най-широко използваните модели за предизвикване на затлъстяване при плъхове са хипоталамусни вентромедиални увреждания, чрез прилагане на мононатриев глутамат (MSG) или чрез директно електрическо увреждане, оофоректомия, хранене с хиперкалорични диети или генетична манипулация. 2 Тези последни методи са много скъпи.

GMS е натриевата сол на L-глутаминова киселина, L-алфа-аминокиселина. Използва се като добавка в храната за подобряване на вкуса. 3 Прилагането му на плъхове в неонаталния период води до разрушаване на дъгообразното ядро ​​на хипоталамуса, което води до невроендокринна и метаболитна дисфункция. Плъховете, лекувани с MSG, развиват хиперадипозитност, нарушен глюкозен толеранс, хиперинсулинемия и забавяне на растежа, които се установяват на възраст около 12 седмици. Действителният механизъм, чрез който хипоталамусното увреждане, причинено от MSG, води до централно затлъстяване, е неизвестен. Известно е, че не се дължи на повишен прием на храна. Натрупването на мазнини може да се дължи отчасти на повишената парасимпатикова активност. 2.4-8

Други промени, дължащи се на липсата на контрол върху оста хипоталамус-хипофиза-надбъбречна жлеза, са: хипоактивност, повишена раздразнителност, намалено тегло на яйчниците, забавен пубертет и повишени серумни нива на глюкокортикоиди. 2,5-8 Те също се проявяват с хиперлептинемия и е доказано намаляване на експресията на лептиновия рецептор в мозъка и други тъкани, като надбъбречните жлези. 9

GMS е евтин реагент. Един килограм от продукта не надвишава $ 150 USD, което може да предизвика затлъстяване при повече от 1000 животни. Това вещество може да се прилага подкожно или интраперитонеално, в доза 2-4mg/g телесно тегло през неонаталния период. За предизвикване на затлъстяване са необходими между 4-10 дози. 2 Тази работа има за цел да избере подходяща схема на лечение за предизвикване на затлъстяване с MSG при плъхове Winstar през неонаталния период.

МЕТОДИ

Изследването е проведено в изследователските лаборатории на отдела по биохимия на Института за основни и предклинични науки Виктория де Гирон. Мононатриев глутамат се прилага на плъхове Wistar през неонаталния период, следвайки три различни режима на лечение (с пет, седем и десет дози), при 4 mg/g/ден и по два начина на приложение: подкожно и интраперитонеално. Контролите са приложени 0.9% натриев хлорид. За да се диагностицира затлъстяването, след 90 дни бяха оценени следните променливи: тегло, дължина на муцуната и ануса и индекс на Ли. Денят на раждането се счита за нулев ден. Следните групи бяха сформирани за прилагане на MSG и NaCL интраперитонеално:

Плъхове, получили MSG от първия до петия ден (D5A-MSG) = 12
Плъхове, които са получавали NaCL от ден 1 до 5 (D5A-C) = 10
Плъхове, получили MSG на втория, четвъртия, шестия, осмия и десетия ден (D5B-MSG) = 12
Плъхове, получили NaCL на втория, четвъртия, шестия, осмия и десетия ден (D5B-C) = 10
Плъхове, получили MSG от първия до седмия ден (D7A-MSG) = 13
Плъхове, получили NaCL от първия до седмия ден (D7A-C) = 10
Плъхове, получили MSG от втория до осмия ден (D7B-MSG) = 13
Плъхове, получили NaCL от втория до осмия ден (D7B-C) = 10
Плъхове, получаващи MSG от ден 1 до 10 (D10-MSG) = 8
Плъхове, получили NaCL от първия до десетия ден (D10-C) = 6

На втори етап, съгласно резултатите, получени при интраперитонеално приложение на MSG, се формират четири групи за прилагане на MSG подкожно при гореспоменатата доза:

Плъхове, получили MSG на втория, четвъртия, шестия, осмия и десетия ден (D5-MSG) = 8
Плъхове, получили NaCL на втория, четвъртия, шестия, осмия и десетия ден (D5-C) = 8
Плъхове, получили MSG от втория до осмия ден (D7-MSG) = 8
Плъхове, получили NaCL от втория до осмия ден (D7-C) = 8

След отбиването плъховете бяха поставени под номер четири до пет на кутия. Те се държат при контролирани условия на температура (22 ± 3 ° C), светлина (12 часа светлина/тъмни цикли) и относителна влажност (60 ± 5%). Храна и вода се доставяха при поискване. По отношение на грижите им бяха спазени принципите на ръководството за грижи и използване на животни за експерименти. Комитетът по етична изследователска дейност одобри процедурите, проведени за това проучване.

Затлъстяването се оценява на 90 дни, като се използва индексът на Ли, изчислен чрез кубичния корен от телесно тегло (g), разделен на дължината на муцуната и ануса (LHA) (cm) .10 Стойност, равна на или по-малка от 0.300, се счита за нормална; по-големи от 0,300, плъховете са класифицирани като затлъстели. Определени бяха и други променливи като: тегло и дължина на муцуната-анус и неонатална смъртност. Резултатите изразяват средната стойност и стандартната грешка (SE) за различните променливи. Теглото, LHA и индексът на Lee са анализирани статистически с помощта на непараметричния U-тест на Mann-Whitney. Нивото на статистическа значимост е взето предвид, когато p 11 Вероятността за нараняване на жизненоважни органи е по-голяма при интраперитонеалния път, което би обяснило, че процентът на смъртните случаи е висок при прилагането на MSG по този път.

Фактът, че няма значителни разлики между теглото на плъховете, инжектирани с MSG, и този на контролите се дължи на факта, че мононатриевият глутамат не увеличава приема на храна.

Твърди се, че тези животни развиват хипофагия. 2 Afifi M et al., Не са установени значими разлики между теглото на плъхове с MSG-индуцирано затлъстяване, бременни и контролите. 9

Установено е, че плъховете, третирани с GMS, са по-малки от контролите. В литературата се съобщава, че този продукт разрушава невроните на дъговидното ядро, при което се произвежда фактор на освобождаване на растежен хормон. Lucinei получава в своето проучване, че плъховете, лекувани с GMS, са намалели с 9,5% спрямо дължината на тялото в сравнение с контролите. 4

При хората, когато и двамата родители са с наднормено тегло, рискът от затлъстяване при тяхното потомство е 80%. В случай, че само един от родителите е с наднормено тегло, рискът се намалява до 40%.

Когато и двамата родители са с нормално тегло, рискът от затлъстяване е 10%. 12 Това може да се приложи за плъхове, което би оправдало появата на затлъстяване в някои контроли.

Като се има предвид, че затлъстяването се развива при 100% от плъховете, с по-нисък процент смъртни случаи, по-малко манипулация и че не са получени значителни разлики в индекса на Лий, се стига до заключението, че най-подходящият модел е прилагането на MSG към съотношението на 4mg/g в пет дози, подкожно, през ден, започвайки втория ден след деня на раждането.