гена

В
В 		В

Моят SciELO

Персонализирани услуги

Списание

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Член

Индикатори

  • Цитирано от SciELO
  • Достъп

Свързани връзки

  • Цитирано от Google
  • Подобно в SciELO
  • Подобно в Google

Дял

Списание за остеопороза и минерален метаболизъм

версия В он-лайн В ISSN 2173-2345 версия В отпечатана В ISSN 1889-836X

Rev Osteoporos Metab Miner В том 9 В № 4 Мадрид В Ноември/Декември В 2017

http://dx.doi.org/10.4321/s1889-836x2017000400003В

1 Служба за костен и минерален метаболизъм - Институт за нефрологични изследвания Reina Sofá - Мрежа за бъбречни изследвания (REDinREN) на здравния институт Carlos III (ISCIII) - Университет в Овиедо - Централна университетска болница в Астурия - Овиедо (Испания)

Ключови думи: В ДНК метилиране; PTH; хронично бъбречно заболяване; паращитовидни жлези; хиперфосфатемия.

Хиперфосфатемията влошава както паратиреоидната хиперплазия, така и секрецията на PTH при пациенти с хронично бъбречно заболяване (ХБН). Хиперплазията е свързана с намаляване на експресията на калциеви рецептори (CaSR), витамин D (VDR) и О ± -Klotho, предизвиквайки резистентност на паращитовидната жлеза да реагира както на лечението, така и на повишаване на FGF23. Това проучване изследва възможния епигенетичен принос на повишения фосфор за влошаване на вторичния хиперпаратиреоидизъм (SHPT) при пациенти с (CRD).

Материали и методи:

Степента на метилиране се сравнява чрез пиросеквениране на бисулфит в богати на CpG последователности на промоторите в гените CaSR, VDR, PTH и О ± -Klotho в ДНК на паращитовидната жлеза от уремични плъхове, хранени с нормална и високо фосфорна диета.

Диетата, богата на фосфор, повишава експресията на PTH и предизвиква значително намаляване на степента на метилиране в промотора на гена PTH. За разлика от това, промоторните области на гените CaSR, VDR и О ± -Klotho не показват значителни разлики в процента на метилиране между двете групи плъхове. По този начин не беше определящият механизъм за намаляване на експресията на тези гени, наблюдаван в SHPT.

Епигенетичните промени, индуцирани от богатата на фосфор диета в SHPT, особено хипометилирането на гена на PTH, могат да допринесат за увеличенията, които се случват в синтеза и секрецията на този хормон. Идентифицирането на участващите механизми би позволило да се проектират по-добри лечения за SHPT в ранните етапи на ХБН.

Ключови думи: В ДНК метилиране; PTH; хронично бъбречно заболяване; паращитовидни жлези; хиперфосфатемия.

За проучването са използвани 4-месечни мъжки плъхове Wistar от животновъдния обект на Университета в Овиедо, подложени на 7/8 нефректомия (NX), състояща се от отстраняване на три четвърти от левия бъбрек и с пълна резекция. десният бъбрек 14 .

Анализ на метилирането на промоторите на изследваните гени с използване на бисулфитно пиросеквениране

Таблица 1В Двойка грундове, използвани при изследвания за метилиранеВ

MTf: PCR температура на отгряване; F1: преден грунд; R1: обратен грунд; SQ: грунд за секвениране.

За анализ на резултатите беше използвана статистическата програма SPSS 17.0. За анализираните количествени променливи се използва t на Student. Разгледани са статистически значими разлики преди р стойности Таблица 2В Общи биохимични маркери и минерален метаболизъмВ

Метилиране на промоторните области на изследваните гени

Фигура 1В Степен на метилиране на сайтовете на CpGs, които предхождат началото на транскрипцията на промотора на A) CaSR гените (-172 до -3); Б) VDR (-533 до -189) и С)? -Клото (-217 до -96) в паращитовидните жлези от нефректомизирани (NX) плъхове, хранени с диета, съдържаща нормален или висок фосфор PN (NX-PN) (NX-PE ) в продължение на 20 седмици. В долната част на всеки ген, анализираната област на промотора и броят на CpG местата в споменатия фрагмент са представени графично.

Фигура 2В Степен на метилиране в сайтовете на CpGs в областта от -342 до +18 на промотора на PTH, която предхожда началото на транскрипцията в паращитовидните жлези от нефректомизирани плъхове (NX), хранени с диета, съдържаща нормален фосфор (NX-PN) или повишен ( NX-PE) за 20 седмици. (* стр

1. Eckardt KU, Coresh J, Levin A. Еволюция на значението на бъбречните заболявания: от субспециалност до глобална здравна тежест. Лансет. 2013; 382: 158-69. [В Връзки]

2. Silver J, Levi R. Клетъчни и молекулярни механизми на вторичния хиперпаратиреоидизъм. Clin Nephrol. 2005; 63: 119-26. [В Връзки]

3. Rodriguez M, Caà ± adillas S, Lopez I, Aguilera-Tejero E, Almaden Y. Регулиране на функцията на паращитовидните жлези при хронична бъбречна недостатъчност. J Bone Miner Metab. 2006; 24: 164-8. [В Връзки]

4. Hu MC, Kuro-o M, Moe OW. Възникващата роля на Klotho в клиничната нефрология. Нефрол Dial трансплантация. 2012; 27: 2650-7. [В Връзки]

5. Korkor AB. Намалено свързване на (3Н) 1,25-дихидроксивитамин D3 в паращитовидните жлези на пациенти с бъбречна недостатъчност. N Engl J Med. 1987; 316: 1573-7. [В Връзки]

6. Ritter CS, Finch JL, Brown AJ. Паратиреоидната хиперплазия при уремични плъхове предшества регулирането на калциевия рецептор надолу. Kidney Int. 2001; 60: 1737-44. [В Връзки]

7. Carmona FJ, Esteller M. Епигеномика на човешкия рак на дебелото черво. Mutat Res.2010; 693: 53-60. [В Връзки]

8. Kim MS, Lee J, Sidransky D. Маркери за метилиране на ДНК при колоректален рак. Метастази на рак Rev. 2010; 29: 181-206. [В Връзки]

9. Ng JM, Yu J. Промоторно хиперметилиране на туморни супресорни гени като потенциални биомаркери при колоректален рак. Int J Mol Sci.2015; 16: 2472-96. [В Връзки]

10. Ким Y, Ким DH. CpG островно хиперметилиране като биомаркер за ранно откриване на рак на белия дроб. Методи Mol Biol.2015; 1238: 141-71. [В Връзки]

11. King GD, Rosene DL, Abraham CR. Промоторно метилиране и свързано с възрастта понижаване на Klotho при маймуна резус. ВЪЗРАСТ. 2012; 34: 1405-19. [В Връзки]

12. Sun CY, Chang SC, Wu MS. Потискането на експресията на Klotho чрез свързаните с протеини уремични токсини е свързано с повишена експресия на ДНК метилтрансфераза и ДНК хиперметилиране. Bidney Int. 2012; 81: 640-50. [В Връзки]

13. Levine MA, Morrow PP, Kronenberg HM, Phillips III JA. Тъканно и генно специфично хипометилиране на гена на човешкия паратиреоиден хормон: асоциация с експресията на гена на паратиреоиден хормон в паращитовидните жлези. Ендокринология. 1986; 119: 1618-24. [В Връзки]

14. Naves DГaz M, Carrillo-López N, Rodríguez-Rodríguez A, Braga S, FernGndez-Coto MT, López-Novoa JM, et al. Диференциални ефекти на 17Г-естрадиол и ралоксифен върху метаболизма на костите и липидите при плъхове с хронично бъбречно заболяване и естрогенна недостатъчност. Менопауза. 2010; 17: 766-71. [В Връзки]

15. Varshney S, Bhadada SK, Sachdeva N, Arya AK, Saikia UN, Behera A, et al. Състоянието на метилиране на CpG островите в промоторите на витамин D и рецепторите, чувствителни на калций, не обяснява намалената генна експресия в паратиреоидните аденоми. J Clin Endocrinol Metab. 2013; 98: E1631-5. [В Връзки]

16. Hofman-Bang J, Gravesen E, Olgaard K, Lewin E. Епигенетично метилиране на паратиреоидни CaR и VDR промотори при експериментален вторичен хиперпаратиреоидизъм. Int J Nephrol. 2012; 2012: 123576. [В Връзки]

17. Uchiyama T, Tatsumi N, Kamejima S, Waku T, Ohkido I, Yokoyama K, et al. Хиперметилиране на гените CaSR и VDR в паращитовидните жлези при плъхове с хронично бъбречно заболяване с високо фосфатна диета. Човешка клетка. 2016; 29: 155-61. [В Връзки]

18. Azuma M, Koyama D, Kikuchi J, Yoshizawa H, Thasinas D, Shiizaki K, et al. Промоторното метилиране осигурява специфична за бъбреците експресия на гена Klotho. FASEB J. 2012; 26: 4264-74. [В Връзки]

19. Almaden Y, Hernandez A, Torregrosa V, Canalejo A, Sabate L, Fernandez Cruz L, et al. Високото ниво на фосфат стимулира директно секрецията и синтеза на паратиреоиден хормон in vitro от човешката паращитовидна тъкан. J Am Soc Nephrol. 1998; 9: 1845-52. [В Връзки]

20. Moallem E, Kilav R, Silver J, Naveh-Many T. Свързване с РНК-протеин и пост-транскрипционно регулиране на експресията на гена на паратиреоиден хормон от калций и фосфат J Biol Chem.1998; 273: 5253-9. [В Връзки]

21. Silver J, Kilav R, Naveh-Many T. Механизми на вторичния хиперпаратиреоидизъм. Am J Physiol Бъбречен физиол. 2002; 283: F367-76. [В Връзки]

22. Takahashi F, Denda M, Finch JL, Brown AJ, Slatopolsky E. Хиперплазия на паращитовидната жлеза без вторичен хиперпаратиреоидизъм. Bidney Int. 2002; 61: 1332-8. [В Връзки]

1 Работа, наградена със стипендия FEIOMM за транслационни изследвания 2014 г.

3 Манипулациите с опитни животни са извършени в съответствие с разпоредбите на действащите правни разпоредби (Директива на Европейския съюз 2010/63/ЕС и Кралски указ 53/2013 от 1 февруари).

ФинансиранеТази работа е възможна благодарение на финансирането, получено от безвъзмездните средства на FEIOMM 2014 за насърчаване на транслационни изследвания.

ФинансиранеДържавен R + D + I план 2013-2016

ФинансиранеInstituto de Salud Carlos III (ISCIII) - Европейски фонд за регионално развитие (PI 09/00415)

ФинансиранеПлан за наука, технологии и иновации 2013-2017 г. на Княжество Астурия (GRUPIN14-028)

ФинансиранеФондация за популяризиране в Астурия на приложни научни изследвания и технологии (FICYT)

ФинансиранеИнститут за нефрологични изследвания Рейна София

ФинансиранеГЌГ ± igo ГЃlvarez de Toledo Renal Foundation

ФинансиранеRETIC RedInRen на ISCIII - Европейски фонд за регионално развитие (RD06/0016/1013, RD12/0021/1023 и RD16/0009)

Финансиранеот Астурийското общество за насърчаване на метаболитните изследвания.

Получено: 18 май 2017 г .; Одобрен: 02 юли 2017 г.

Кореспонденция: Manuel Naves DГaz - Seo and Mineral Metabolism Service - Central University Hospital of Asturias - FINBA Building, First Floor F1.1 (Aula 14) - Avenida de Roma, s/n - 33011 Oviedo (Spain) Mail email: manuel @ hca .es

Конфликт на интереси:

Авторите декларират, че не са в конфликт на интереси.

В Това е статия, публикувана в отворен достъп под лиценз Creative Commons