слюнка

В
В 		В

Услуги по заявка

Вестник

  • SciELO Analytics
  • Google Scholar H5M5 ()

Член

  • Испански (pdf)
  • Статия в xml формат
  • Препратки към статии
  • Как да цитирам тази статия
  • SciELO Analytics
  • Автоматичен превод
  • Изпратете тази статия по имейл

Индикатори

  • Цитирано от SciELO
  • Статистика за достъп

Свързани връзки

  • Подобни в SciELO

Compartir

Витална стоматология

Онлайн версия В ISSN 1659-0775 Печат В версия ISSN 1659-0775

Витална стоматология в n.26 в Сан Педро, Лурд де Монтес де Ока януари/юни 2017 г.

Клинична диагноза в слюнка. Преглед

Клинична диагноза слюнка. Преглед

1 Латински университет в Коста Рика, Коста Рика, [email protected]

Ключови думи: В Биомаркери; фармакотерапия; имунохистохимия; FRET; желатинова зимография; ДНК микрочипове

Ключови думи: В Биомаркери; фармакотерапия; имунохистохимия; FRET; желатинова зимография; ДНК микрочипове

Днес е известно, че състоянията на здраве и болести имат молекулярна основа и в основата на това е интердисциплинарен инструмент: биохимия. Всеки правилен клиничен критерий има биохимична обосновка.

Молекулярната структура, която се появява в презентацията на тази работа, е матрична металопротеиназа, MMP 12. За да научите повече за този вид ензим, функцията, която той изпълнява и как е свързан с две антагонистични събития: клетъчен растеж и диференциация, която е домейн на живота, а метастазите на рака, който е област на смъртта, изискваха много изследователски усилия.

Фигура 1В MMP 12, свързан с неговия инхибитор NNGH чрез цинковия атом в активното място на ензима. Кристалографска структура в PDBВ

NCBI (Национален център за биотехнологична информация). Достъпно на: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/.

• NLM (Национална медицинска библиотека). Достъпно на: http://dtd.nlm.nih.gov/.

• EBSCO Health. Достъпно на: https://health.ebsco.com/?_ga=1.46795623.1501374684.1472540416.

• Публикувано. Достъпно на: www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed.

• IIB-INTECH (Институт за биотехнологични изследвания-Технологичен институт Chascomес). Достъпно на: http://www.iib.unsam.edu.ar/web/papiros.php?a=

• PDB. Банка с данни за протеини: Достъпно на: www.rcsb.org/pdb/

• база данни BRENDA (Институт по биохимия на Университета в Кьолн, Германия). Достъпно на: www.brenda.uni-koeln.de

• NIH US National Library of Medicine. Достъпно на: https://www.nlm.nih.gov/

Друг аспект, който не благоприятства извличането на кръв като източник на ДНК, е, че тя изисква специални условия за съхранение и транспорт.

В допълнение, той може да бъде замърсен с хемоглобиново желязо от еритроцити; който е инхибитор на ДНК полимераза, ензим, използван в полимеразната верижна реакция (PCR), който влияе върху последващия анализ на ДНК. (Херндез, 2012)

В страни като Канада се използва за изготвяне на индивидуални рецепти за лекарства при лечение на психични заболявания.

Това приложение се основава на използването на геномна ДНК от слюнка при проучвания с единичен нуклеотиден полиморфизъм (SNP); които позволяват да се установят вариациите в гените, които експресират ензими от типа на цитохром Р-450 (CYP-450). Тези ензими участват във фаза I на чернодробния метаболизъм на антидепресанти и антипсихотици. (Хасан, 2016)

Фигура 2В CYP3A4. Участва в метаболизма на повече от 40 лекарства. Кристалографска структура в PDB.В

Полиморфизмите от тип SNP могат да доведат до три вида афектации.

• Повишаване на скоростта на метаболизма, което прави нормалната доза от лекарството неефективна.

• Намаляване на способността на ензимния метаболизъм, което може да доведе до увеличаване на свободната фракция на лекарството и неблагоприятни ефекти.

• Неекспресията на ензима, което кара човека да не може да метаболизира лекарството, което генерира остра интоксикация.

Те прилагат протоколи за вземане на проби, съхранение и транспортиране до мястото за изпитване. Не замърсяването на извлечената ДНК може да се установи, при първия вариант, с UV/V спектрофотометър. При 280 nm, замърсяване от протеини и при 230 nm, от неорганични съединения. ДНК сигналът се отчита при 260 nm с присъствието на единичен спектроскопски пик.

Критерий за качеството на ДНК е съотношението А260/А280 между 1,8-2,0.

Използването на гел електрофореза има за цел да подобри чистотата на ДНК, да провери дали не са настъпили процеси на разграждане и да определи размера на фракцията с помощта на маркери за молекулно тегло. И накрая, функционалността на ДНК се проверява с полимеразната верижна реакция (PCR), която позволява да се получат за няколко часа голям брой копия на предварително избрана ДНК последователност.

Фигура 3В Етапи на получаване на геномна ДНК от слюнка.

Фигура 4В Хемотаксис на левкоцитите от левкотаксинВ

Има няколко точки на съгласие между кърмата и слюнката, тъй като и двете съдържат:

• И двете течности имат средно pH по-ниско от кръвната плазма. В случай на кърма около 6,6 и слюнка между 6,5-7,5; в нестимулираната, въпреки че рН на стимулираната слюнка може да е малко по-висока поради увеличаване на секрецията на HCO3.

Фигура 5В Основни компоненти на MECВ

Протеогликаните свързват линейни (неразклонени) гликани с високо молекулно тегло с повтарящи се дизахаридни единици. Те са макроподдържащи структури за съединителна тъкан и хрущял.

При растежа и диференциацията на клетките ремоделирането се извършва в ECM чрез матрични металопротеинази (MMP), които чрез разграждане на ECM протеините позволяват клетъчна миграция. Тези промени в матрицата са необходими, но трябва да бъдат регулирани чрез сложни процеси на активиране-инхибиране; Когато тези процеси се променят, ECM губи своята функция на сдържане, което се случва при определени форми на рак и артериосклероза. (Stryer, 2015)

Тези заличавания потвърждават важна роля на ММР 3 в невровъзпалението. (Кристиансън, 2012)

Фигура 6В Схема на съединителната тъкан на извънклетъчния матрикс, лежащ под базалната ламина, която поддържа епителния слой В

Фигура 7В NNGH инхибитор. Той се появява в структурата на MMP 12, показана на фигура 1.В

използва флуоресцентни хромофорни групи (флуорофори).

Имунохистохимията има широк спектър на приложение в хистопатологичните изследвания за диагностика и класификация на тумори с или без наличие на метастази. С моноклонални антитела могат да се установят прогнози и прогнози за тумори; правят изследвания на вирусни или туморни антигени; идентифицират тъканните протеини и откриват имунни комплекси, постигайки по-ефективно лечение.

Активното разцепване на каспаза-3 разцепва Bid протеин от Bcl-2 комплекса за апоптоза. Активирането на Bid увеличава пропускливостта на митохондриалната мембрана, причинявайки изтичане на цитохром с, вътреклетъчния ефектор, който усилва апоптозата. По този начин имунохистохимията позволява да се установят различия в апоптотичния отговор в болната устна тъкан. (Нелсън и Кокс, 2014)

Анализ на ДНК микрочипове

Фигура 8В Вляво: повърхност на микрочипа с хиляди микрокухини. Право; микрокухина на микрочипа с вмъкнати копия на специфичен ген.

Фигура 9В Етапи на анализа на ДНК микрочипове.В

Предизвикателство, представено от тези проучвания, е да се постигне висока степен на спазване на даренията на пациенти и ефективна и евтина система за събиране, съхранение и транспортиране на проби, която позволява създаването на геномни ДНК банки в подкрепа на мащабни изследвания.

В този смисъл са очевидни редица предимства на вземането на проби от слюнка.

• Избягвайте венепункцията и свързаните с нея рискове от инфекции, както за пациентите, така и за здравния персонал.

• Транспортирането на пробите се извършва при стайна температура и пощенската услуга може да се използва за извършването му.

• Събирането на проби не се влияе от специални състояния на пациенти като възрастни хора, новородени и недоносени бебета или хора със съдови нарушения.

• Вземането на проби може да се направи толкова пъти, колкото е необходимо със съгласието на пациентите.

• Позволява да се извършват голям брой определяния, в допълнение към използването на геномна ДНК, поради голямото технологично развитие в областта на клиничния и токсикологичен анализ.

Въпреки че пробите от слюнка имат някои недостатъци по отношение на кръвните проби, те са решени до голяма степен, без да се засягат техните предимства.

• Ензимната активност на някои орални бактерии може да повлияе на някои тестове.

• Наличието на остатъци от храна и слуз в пробите е противодействано от увеличаването на обема на пробите и процесите на филтриране.

Фигура 11В Приложения за диагностика в слюнката.В

Но ползите са няколко: използване на човешкия потенциал, който завършват университети, разработване на бази данни, приложими за епидемиологични проучвания, и подобряване на диагностиката и лечението. Разработването на политики в този смисъл би оказало влияние върху стоматологията, както на ниво учебни програми, така и в клиничната практика.

Авраам, J.E. и него. (2012). Пробите от слюнка са жизнеспособна алтернатива на кръвните проби като източник на ДНК за генотипиране с висока производителност. [В Връзки]

Бахло М. и Гъл. (2010). ДНК, получена от слюнка, се представя добре в мащабни проучвания с микронутрит с единичен нуклеотиден полиморфизъм с висока плътност. Ракови епидемиолни биомаркери и профилактика. 19 (3): 794-798. [В Връзки]

Barriga, A. G и HernÃndez, S. E. (2016). Полезност на проби от слюнка при лабораторна диагностика. Преподобна Latinoam Patol Clin Med Lab.63 (1): 13-18. Електронната версия е достъпна на: http://www.medigraphic.org.mx/ [Връзки В]

Купува, Диего Л. и Гл. (2007). Основна интерпретация на имунохистохимията. Общи характеристики на различни антитела и тяхното клетъчно и субклетъчно местоположение. Патология. Латиноамериканско списание. 45 (3): 126-140. [В Връзки]

C. A. Christianson, B. L. Fitzsimmons, J. H. Shim et al. (2012). Спиналната матрична металопротеиназа 3 медиира възпалителната хипералгезия чрез TNF зависим механизъм. Невронаука 200 199-210. [В Връзки]

CastrillÃn LE, Palma A, MacÃn S. (2011). Роля на лактоферина при пародонтални заболявания. Мексиканско списание за одонтология; 15 (4): 231 - 238. [В Връзки]

Девлин, М. Т. (2015). Биохимия. Том I и II. 4-то издание. Редакционно връщане. [В Връзки]

Хансен, Т.В. и него. (2007). Събиране на проби от кръв, слюнка и букални клетки в пилотно проучване върху датската кохорта от медицински сестри: сравнение на степента на отговор и качеството на геномната ДНК. Ракови епидемиолни биомаркери и профилактика. 2072-2076. [В Връзки]

Hasan M, Siegmund and W. Oswald S. (2016). Бърз LC-MS/MS: метод за определяне на съотношението 4-хидроксихолестерол/холестерол в серума като ендогенен биомаркер за активността на CYP3A при хора и жребчета. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 5 август; 1033-1034: 193-199. [В Връзки]

Херндез, А. А. и Аранзаз, Г. С. (2012). Характеристики и физико-химични свойства на слюнката: преглед. Преподобни UstaSalud. 11 (101-111). [В Връзки]

Джеймс, С и др. (2011). Съдържание на човешка геномна ДНК в проби от слюнка, събрани с комплекта за самосъбиране Oragene®. ДНК Genotek. PD-WP-011 Брой 4/11. [В Връзки]

Leite, A. F. et Ўl. (2016). Имуноекспресията на разцепена каспаза-3 показва по-ниски индекси на апоптотична площ при карциноми на устните, отколкото при интраорален рак. J Appl Oral Sci. Юли-август. 24 (4): 359-365. [В Връзки]

Матюс, К. К. и Гл. (2013). Биохимия. 4-то издание. Редакционен Пиърсън. [В Връзки]

Murray, R. K. et al. (2015). ХАРПЪР. Илюстрирана биохимия. 29-то издание. Макгроу Хил. [В Връзки]

Нелсън, Д. Л. и М. М. Кокс (2014). Lheninger. Принципи на биохимията. 6-то издание. Редакционна Омега. [В Връзки]

Novoa-HerrÃn, Sandra S. (2011). IGF-II стимулира активността на MMP-9 и MMP-2 в модел на човешки трофобласт. Acta Biologica Colombiana 16 (1): 121-132. [В Връзки]

СЕБИЯ (2015). Електрофореза с агарозен гел. Хидрагел 7 Протеин (Е). Реф. 4100 [В Връзки]]

Stryer, Lubert (2015). Биохимия с клинични приложения. Том I и II. 7-мо издание. Редакционно връщане. [В Връзки]

Тодорович, Дозич I и др. (2006). Слюнчени ензими и пародонтоза. Med Oral Patol Oral Cir Bucal 2012; 11: 115 - 119. [В Връзки]

Получава: 03 септември 2016 г .; Одобрен: 14 октомври 2016 г.

В Това е статия, публикувана в отворен достъп под лиценз Creative Commons