Мил: Международен патент (Договор за патентно сътрудничество). Резюме на патент/изобретение. Номер на заявлението: PCT/EP2003/005876.

трипептиди

Гражданство на заявителя: Холандия.

Адрес: HET OVERLOON 1 6411 TE HEERLEN НИДЕРЛАНДИЯ.

Международна патентна класификация:

  • A23J3/10РАЗДЕЛ А - ТЕКУЩИ НУЖДИ НА ЖИВОТА. ›A23ХРАНА ИЛИ ХРАНИТЕЛНИ ПРОДУКТИ; ВАШЕТО ЛЕЧЕНИЕ, НЕ ПОКРИТО ОТ ДРУГИ КЛАСОВЕ. ›A23JПРОТЕИНОВИ СЪСТАВИ ЗА ХРАНА; ЛЕЧЕНИЕ НА ПРОТЕИНИ ЗА ХРАНА; ФОСФАТНИ СЪСТАВИ ЗА ХРАНА. ›A23J 3/00 Протеиново лечение за храна. ›Казеин (сушене на казеин A23J 1/22).
  • A23J3/34 A23J 3/00 […] ›с помощта на ензими.
  • C12N15/57СЕКЦИЯ В - ХИМИЯ; МЕТАЛУРГИЯ. ›C12БИОХИМИЯ; БИРА; АЛКОХОЛНИ НАПИТКИ; ВИНО; ОЦЕТ; МИКРОБИОЛОГИЯ; ЕНЗИМОЛОГИЯ; ТЕХНИКИ НА МУТАЦИЯ ИЛИ ГЕНЕТИКА. ›C12N МИКРООРГАНИЗМИ ИЛИ ЕНЗИМИ; СЪСТАВИ, КОИТО ИХ СЪДЪРЖАТ (биоциди, продукти, които отблъскват или привличат вредни животни, или регулатори на растежа на растенията, които съдържат микроорганизми, вируси, микроскопични гъби, ензими, ферментационни продукти или вещества, получени от или извлечени от микроорганизми или животински вещества A01N 63/00; препарати за медицинска употреба A61K; торове C05F); Размножаване, отглеждане или опазване на микроорганизми; МУТАЦИИ ИЛИ ГЕНЕТИЧНИ ИНЖЕНЕРНИ ТЕХНИКИ; МЕДИИ ЗА КУЛТУРА (среда за микробиологични тестове C12Q 1/00). ›C12N 15/00 Техники за мутация или генно инженерство; ДНК или РНК, свързани с генното инженерство, вектори, напр. напр. плазмиди или тяхното изолиране, тяхното приготвяне или пречистването им; Използване на гостоприемници за това (мутанти или микроорганизми, модифицирани чрез генно инженерство C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; нови растения като A01H; размножаване на растения чрез техники за тъканна култура A01H 4/00; нови раси животни като такива A01K 67/00; използване на лекарствени препарати, съдържащи генетичен материал, който се въвежда в клетките на човешкото тяло за лечение на генетични заболявания, генна терапия A61K 48/00; пептиди като цяло C07K). ›Това действие върху пептидните връзки (3.4).
  • C12N9/48 C12N […] ›C12N 9/00 Ензими, стр. напр. лигази (6.; Проензими; Състави, съдържащи ги (препарати за почистване на зъби, съдържащи ензими A61K 8/66, A61Q 11/00; препарати за медицинска употреба, съдържащи ензими A61K 38/43; препарати за детергенти, съдържащи ензими C11D); Процеси за приготвяне, активиране, инхибират, отделят или пречистват ензимите. ›Действат върху пептидни връзки, напр. тромбопластин, левцин аминопептидаза (3.4).

  • Fb
  • Twitter
  • 📞
  • ✉

Фрагмент с описание:

Протеинов хидролизат, богат на трипептиди.

Област на изобретението

Настоящото изобретение се отнася до протеинов хидролизат и неговото използване. Предшестващо състояние на изобретението

Нараства интересът към използването на протеинови хидролизати както за медицински, така и за немедицински приложения. И при двете приложения от основно значение е лесно усвоимата диета, която предлага улеснено усвояване на стомашно-чревни протеини. Протеиновите хидролизати за медицински приложения също изискват много ниски алергенни свойства. За продукти, предназначени за немедицински приложения, приятните вкусови характеристики и задоволителната разтворимост при киселинни условия са важни характеристики. За съжаление, процесът на хидролиза, необходим за постигане на тези предимства, носи няколко недостатъка. Те включват горчиви остатъчни аромати, остатъчни имуногенни материали, ниски добиви на хранително необходими аминокиселини, високи осмотични стойности, причинени от освобождаването на свободни аминокиселини, и накрая, ограничена стабилност в кисела среда.

В предишни публикации са описани различни ензимни смеси, насочени към оптимизиране на характеристиките на хидролизата и намаляване на производствените разходи. Всички тези публикации се отнасят до използването на единични или смесени ендопротеази. Примерите включват ЕР321 63, който се отнася до използването на ендопротеази, получени от животни като трипсин, химотрипсин и панкреатин, както и ЕР 325 986 и WO 96/13,174, които благоприятстват използването на ендопротеази, получени от видове Bacillus или Aspergillus. За съжаление, тези ензимни комбинации винаги произвеждат пептидни смеси, които са горчиви и показват широко разпределение на молекулното тегло. Пептидите с високо молекулно тегло са нежелани, тъй като те са отговорни за алергенния отговор и тяхното усвояване изисква допълнителни етапи на ензимна обработка в червата. Намаляването на горчивия послевкус в хидролизатите прави използването на екзопротеази като аминопептидази или карбоксипептидази задължително. Недостатъци на този горчив процес на отстраняване са отделянето на значителни количества свободни аминокиселини и по този начин неприятни сопообразни вкусове и загуба на хранително важни аминокиселини.

В заключение, индустриалното производство на протеинови хидролизати продължава да се основава на ензимни смеси, които далеч не са оптимални, така че са необходими скъпи етапи на пречистване, за да се получат пептидни смеси, които имат неоптимално разпределение на размера.

След нормална диетична абсорбция протеините, присъстващи в храната, постепенно се хидролизират на по-малки фрагменти, които в крайна сметка се транспортират през стената на тънките черва. По време на преминаването през стомашно-чревния тракт са активни редица различни протеази с произход от стомаха, панкреаса и тънките черва. Ендопротеазите като пепсин, трипсин и химотрипсин разцепват протеини с високо молекулно тегло в по-малки олигопептиди. След това тези олигопептиди се хидролизират допълнително от редица други ензими като ди- и трипептидил пептидази, както и амино- и карбоксипептидази. Последните стъпки на хидролиза се провеждат в тънките черва и водят до смес от свободни аминокиселини и ди- и трипептиди (Grimble, G.K. 1994. Annu.Rev.Nutr. 14; 419-447).

Неотдавнашната комерсиализация на различни протеинови хидролизати, претендиращи за антихипертензивни ефекти, подчертава увеличения обхват на използване на протеинови хидролизати, съдържащи "биоактивни" пептиди в медицински и немедицински приложения. Тези биоактивни пептиди и протеинови хидролизати, съдържащи такива биоактивни пептиди, са описани в многобройни патентни заявки. Например, WO 97/78 описва хидролизати, получени чрез инкубация с пробиотични бактерии или ензими, получени от такива бактерии. WO

99/16,461 описва инхибирането на специфичен пептиден ангиотензин конвертиращ ензим, получен чрез ферментация на Lactobacillus. WO 1/32.95 описва получаването на продукт, съдържащ антихипертензивни пептиди чрез ферментация на казеин с млечнокисели бактерии. Няколко други приложения (виж например WO 1/68,114) описват използването на силно пречистени или химически синтезирани пептиди за намаляване на кръвното налягане или лечение на диабет, бъбречно увреждане или затлъстяване.

Описание на изобретението

Настоящото изобретение осигурява процес за получаване на протеинов хидролизат, който е богат на трипептиди, при който най-малко 2 молни% от пептидите имат молекулно тегло от 2 до 2 Da и присъстват като трипептид и в който най-малко 3% от трипептидите имат карбокси-краен пролин. За предпочитане, протеиновият хидролизат от изобретението е лишен от горчивина. Хидролизатът може по избор да съдържа дипептиди.

Съгласно предпочитано изпълнение на метода от изобретението, избраният протеин или протеинов субстрат се свързва с подходяща ендопротеаза. Тази подходяща ендопротеаза за предпочитане е пролин специфична ендопротеаза (PSE или EndoPro), по-предпочитано PSE се използва. Освен това, този субстрат е в контакт с подходяща трипептидаза (TPAP) или смес от трипептидази. Такива трипептидази се определят като ензими, способни да освобождават трипептиди от полипептид, или от N-крайната страна на полипептида, която следователно обхваща така наречените трипептидази, или от С-крайната страна на полипептида, като по този начин обхваща т.нар. пептид-трипептидази. За предпочитане, протеиновият субстрат първо се ферментира с ендопротеаза, като серин протеаза, металоендопротеаза или аспарагинова протеаза, за частична хидролиза на протеина. Установено е, че TPAP като цяло е по-ефективен при такива предварително валцувани протеинови субстрати.

Методът съгласно изобретението включва комбинация от една или повече ендопротеази с една или повече трипептидази. Изгодно е, че ензимите се използват изолирано и в диапазон от съотношения на протеинова трипептидаза към ендопротеаза, съставени между 1: 5 и 1: 5, за предпочитане между 1:, 1 до 1: 1.

Образуваният протеинов субстрат или частичен хидролизат може първо да бъде подложен на първата подходяща ендопротеаза и впоследствие може да се добави TPAP или смес от TPAP. В случаите, когато оптималните условия на ензимна активност са приблизително еднакви, може да се предпочете едноетапен процес. За предпочитане TPAP, използван в настоящия процес, е TPAP, който след инкубация при рН 5 в продължение на един час при 5 ° C проявява поне 7% остатъчна активност върху Ala-Ala-X-pNA субстрат, измерен в пример 1. X може варират в зависимост от въпросния TPAP в зависимост от спецификата на TPAP. X е аминокиселинен остатък, който поражда най-малко значителна активност на TPAP (виж например фиг. 1).

За да бъде полезен като помощно средство за обработка при приготвянето на фуражни съставки, ензимът трябва да отговаря на изискванията. [Продължавай да четеш]

Вземания:

1. Протеинов хидролизат, в който поне 2 молни% от пептидите с молекулно тегло от 2 до 2 далтона присъстват в хидролизата като трипептид и в който поне 3% от трипептидите имат карбокси-пролинов пролин.

2. Протеинов хидролизат съгласно претенция 1, характеризиращ се с това, че най-малко 25 мол.% Или по-предпочитано поне 3 мол.% От пептидите с молекулно тегло от 2 до 2 далтона присъства в хидролизата като трипептид.

3. Протеинов хидролизат съгласно претенция 1 или 2, характеризиращ се с това, че за предпочитане поне 2%, за предпочитане поне 3% или още по-добре поне 4% от пролина, присъстващ в изходния протеин, присъства в трипептидите.

4. Протеинов хидролизат, съгласно която и да е от претенции от 1 до 3, където поне 35% от трипептидите имат карбокси-краен пролин.

5. Протеинов хидролизат, съгласно която и да е от претенции от 1 до 4, където поне 7 молни% от пептидите или за предпочитане поне 75 молни% от пептидите съдържат 2 до 7 аминокиселинни остатъка (дипептид до хептапептид).

6. Метод за получаване на протеинов хидролизат, като методът включва контакт на протеинов субстрат с:

а) 1 специфична за пролин ендопротеаза, имаща киселинно рН оптимум; Y.

б) 1-трипептидил-аминопептидаза.

7. Използване на протеиновия хидролизат съгласно всяка една от претенции 1 до 5 за консумация от бозайници, за предпочитане от хора.

8. Ензимен състав, съдържащ

а) пролин-специфична ендопротеаза, имаща киселинно рН оптимум; Y.

б) трипептидил аминопептидаза.

9. Ензимен състав съгласно претенция 8, където трипептидил аминопептидазата е способна да се разцепва зад остатъците от глутамин/глутамат и аспарагин/аспартат.

1. Ензимен състав съгласно претенции 8 или 9, при който, когато този състав е добавен към подходящ протеин, той е способен да произвежда протеинов хидролизат съгласно която и да е от претенции 1 до 5.

11. Хранителен или фуражен продукт, съдържащ хидролизат, съгласно която и да е от претенции 1 до 5.

12. Използване на ензимен състав съгласно която и да е от претенции 8 до 9 за намаляване на непоносимостта към хранителни продукти, богати на пролин.

10. Използване на ензимен състав съгласно която и да е от претенции 8 до 9 в храни или фуражи или при производството на храни или фуражи

Подобни или сродни патенти:

Методи за производство на казеин, от 7 декември 2018 г., от Select Milk Producers, Inc: Метод за производство на мицеларен казеин, който включва стъпките на: a. Филтрирайте първоначален продукт, който съдържа обезмаслено мляко, пастьоризирано чрез микрофилтрация, [...]

Използване на сиалидаза в млечните технологии, от 6 декември 2017 г., от DSM IP ASSETS B.V.: Метод за приготвяне на кисело мляко или кисело мляко за пиене, който включва добавяне на сиалидаза и подкисляващ агент към протеин, който съдържа сиалова киселина, позволявайки […]

Течен хранителен състав, богат на енергия с подобрени органолептични свойства, от 25 октомври 2017 г. от Н.В. NUTRICIA: Течен хранителен състав с pH в диапазон от 6 до 8, съдържащ 6 до 20 g/100 ml протеин, където споменатият протеин съдържа мицеларен казеин, където [...]

Преработено сирене, обогатено с калций, без емулгиращи соли и процедура за приготвянето му от 13 септември 2017 г. на FONTERRA CO-OPERATIVE GROUP LIMITED: Метод за приготвяне на преработено сирене без емулгиращи соли, който включва: състав с желирано мляко […]

Метод за производство на бета-казеинови състави, от 21 декември 2016 г., от ARLA FOODS AMBA: Метод за получаване на състав, съдържащ бета-казеин, методът включва стъпките на: а) предварително загряване на млякото чрез регулиране на температурата [… ]