Обобщение

Мозъчният серотонин играе решаваща роля в регулирането на приема на храна и хомеостазата на телесното тегло. Горните данни предполагат взаимодействие с кортикотропин-освобождаващ хормон (CRH). За по-нататъшно изследване на взаимодействието между тези невротрансмитери, селективният инхибитор на обратното поемане на серотонин (SSRI) с флувоксамин се прилага интраперитонеално на Zucker fa/fa плъхове със и без CRH рецепторен антагонист. Третираните с физиологичен разтвор животни напълняват. Флувоксамин доведе до значителна загуба на тегло, без това да повлияе на приема на храна. Освен това, нивата на инсулин в този животински модел са намалени след приложение на флувоксамин. Тези ефекти са антагонизирани от α-спирална CRH и следователно най-вероятно се медиират чрез CRH или CRH-подобни пептиди.

Достъпът е предоставен от

Въведение

Селективните инхибитори на обратното поемане на серотонин (SSRIs) обикновено се използват като медикаментозно лечение при депресивни разстройства. Известно е, че тези лекарства влияят централно на приема на храна и хомеостазата на телесното тегло. Това е в съгласие с експериментални данни, които показват силни анорексични свойства на серотонина, когато се инжектира в паравентрикуларното ядро ​​(PVN) и други хипоталамусни области. 12

В настоящото проучване ние се фокусираме върху анорексичните свойства на ssri флувоксамин, който е по-специфичен за серотонина в сравнение с други съединения от тази група лекарства, като флуоксетин, който има по-малко ефекти върху обратното поемане на норепинефрин. 3

Горните данни показват, че в рамките на PVN серотонинът и кортикотропин-освобождаващият хормон (CRH) взаимодействат, за да променят приема на храна и е показан повишен синтез на CRH в това конкретно ядро ​​след инжектиране на серотонин. 4, 5 Освен това е демонстриран стимулиращ ефект на D-фенфлурамин, освобождаващ серотонин агент, върху невронално активиране на CRH-експресиращи клетки в PVN. 6 CRH явно притежава анорексични свойства, когато се инжектира централно. 7 Все още не е доказана причинно-следствена връзка между невротрансмитера серотонин и невропептида CRH. В допълнение към своите анорексични действия, CRH стимулира метаболизма на кафявата мастна тъкан чрез активиране на симпатиковата нервна система при гризачи, когато се прилага централно, 8, 9, което може да доведе до увеличаване на енергийните разходи.

При плъховете fa/fa на Zucker, mRNA на рецептора на CRH 2 е намалена във вентромедиалния хипоталамус (VMH), което предполага евентуално участие на CRH невроните в намалените енергийни разходи в този генотип; 10 освен това хиперинсулинемията при тези животни, която се дължи на повишена активност на вагусните клетки в панкреаса, 11 намалява след локално приложение на CRH към VMH.

Целта на това проучване е да се изследва по-нататък естеството на мозъчния серотонин и взаимодействието на CRH при контролиране на телесното тегло, което не е проучвано преди това в дългосрочен in vivo експеримент.

Методи

Хлоралхидратът и α-спиралната CRH са закупени от Sigma Chemie (Deisenhofen, Германия). Флувоксамин малеат е получен от Solvay Duphar. Инсулинът се определя от Insulin RIA 100 от Pharmacia и Upjohn Diagnostics AB, Швеция.

Изследвани са хомозиготни фа/фа мъжки плъхове от Harlan-Winkelmann, Borchem, Германия. В началото на експеримента животните бяха на 12 седмици и тежаха между 300 и 400 g. Животните се държат в отделни клетки при постоянна стайна температура от 23 ° С в рамките на 12 часа цикъл светлина/тъмнина и им се позволява да се адаптират към условията на отглеждане преди операцията в продължение на поне 4 дни. Други автори 12 са показали, че дозите на α-спирална CRH и флувоксамин са ефективни и че ние сме тествани в пилотно проучване.

Животните бяха разпределени в четири експериментални групи: група 1-0, 5 ml ip физиологичен разтвор и 10 µl физиологичен разтвор на icv, n = 7; група 2: флувоксамин ip (25 mg/kg телесно тегло в 0,5 ml физиологичен разтвор) и α-CRH icv (25 ug в 10 ul физиологичен разтвор), n = 5; група 3: флувоксамин ip (25 mg/kg телесно тегло в 0,5 ml физиологичен разтвор) и 10 µl физиологичен разтвор на icv, n = 6; и група 4-0,5 ml физиологичен разтвор ip и α-CRH icv (25 µg в 10 µl физиологичен разтвор), n = 4.

Пункцията на бедрената артерия и имплантирането на катетър бяха извършени за вземане на кръвни проби. Хлорал хидрат в доза от 0,4 g на kg телесно тегло се прилага ip за анестезия. По време на операцията телесната температура се поддържа от регулирана нагревателна подложка. Стъклен капиляр беше поставен в лявата странична камера за инжектиране с помощта на стереотаксичен инструмент. Необходимите координати са взети от атласите Paxinos и Watson. 13 През първия следоперативен ден експерименталните животни бяха поставени в специална клетка, която осигуряваше свободен достъп до плъха без промени. След адаптационен период от 30 минути се взема серумна проба за определяне на базалната инсулинова стойност и се извършва ip инжекция. След инжектиране се вземат кръвни проби на 30, 60, 90 и 120 минути. Извлеченият обем се замества с физиологичен разтвор веднага след всяко събиране; общото количество взета кръв не надвишава 1,5 ml за всяко животно. Пробите се центрофугират незабавно; Серумът се събира и замразява при -70 ° С до анализ на инсулина.

Приемът на храна и телесното тегло на животните са документирани през следващите 7 дни. Телесното тегло на плъховете е измерено в деня на операцията и веднъж на ден между 12:00 и 14:00 през периода на наблюдение. Експерименталните животни получават ip и icv третиране в 8 часа сутринта в продължение на седем последователни дни. Плъховете бяха жертвани между 13:30 и 14:30 ч., В средата на светлинната фаза на цикъла светлина/тъмнина.

Статистическите анализи бяха извършени с помощта на SPSS, версия 8.0 за Windows. ANOVA беше извършена за многократни измервания върху сурови данни и 2 × 2 ANOVA беше извършена върху нормализирани данни. T тестът на Tukey се използва като post hoc тест за сравнение след повторни измервания ANOVA.

Резултати

Фигура 1 показва развитието на телесното тегло по време на експеримента. Докато животните, третирани с комбинация от ip физиологичен разтвор и физиологичен разтвор на icv (група 1), са получили общо 20,57 ± 5,63 g телесно тегло в края на проучването, животните, третирани с ip флувоксамин и icv физиологичен разтвор (група 3), показват изразена загуба на тегло от -22,97 ± 14,34 g. След комбинираното приложение на флувоксамин ip и a-спирална CRH icv (група 2), наддаването на тегло на животните беше частично възстановено (14.47 ± 8.29 g). Животните, лекувани с α-спирален CRH icv/ip физиологичен разтвор (група 4), са получили 3,74 ± 2,85 g по време на периода на наблюдение. Групи 1, 2 и 4 не се различават значително една от друга, докато загубата на тегло в група 3 е значително по-малка в сравнение с другите групи (Р

ефекти

Базалната хиперинсулинемия при плъхове fa/fa на Zucker е обяснена с повишен парасимпатиков поток към ендокринния панкреас 2, 20 и може да бъде намалена при прилагането на ICV ICH. 13 Нашите данни ясно подкрепят идеята, че ефектите на флувоксамин върху секрецията на инсулин се медиират от CRH, тъй като те са премахнати от α-спирална CRH поне отчасти.

В обобщение, резултатите от нашите експерименти ясно показват, че CRH или CRH-подобни пептиди са силно включени в серотонинергичната регулация на телесното тегло.

Израз на благодарност

Флувоксамин е любезно предоставен от Pharmacia & Upjohn, Швеция. Експерименталните протоколи за животните и грижите за тях са в съответствие с германското законодателство и са одобрени от комитета за грижа за животните. Всички експерименти отговарят на най-високите стандарти за грижа за хората.