ПРЕГЛЕД НА СТАТИИТЕ

лаборатории

Staphylococcus aureus и неговата идентификация в микробиологични лаборатории. Библиографски преглед

Staphylococcus aureus и неговата идентификация в микробиологични лаборатории. Библиографски преглед

Д-р Оскар Хернандес Бетанкур; Lic. Yaidimi Ulloa Cuesta; Д-р Дъглас дел Рио Мендес; Мария дел Кармен Галдос

Carlos J. Finlay Висш институт по медицински науки. Център за имунология и биологични продукти CENIPBI. Камагуей, Куба.

Направен е сборник с повече от 30 публикации, които разглеждат новите изследвания върху основните елементи, които се намесват в механизма на инфекцията и най-използваните диагностични методи за откриване на заболяването. Стафилококус ауреус от микробиологични лаборатории по света и Куба. Нови молекули, допринесли за инфекциозния процес на субекта, са във фазата на изследване, за някои от тях е описана тяхната роля в механизма. Най-широко разпространеният метод в Куба е тестът с тръбна коагулаза. Беше решено да се докладват методите, които се използват най-често при диагностицирането на този обект, включително най-новите, все още във фазата на проучване и стандартизация в някои случаи, както и да се предоставят някои от основните елементи или фактори, участващи в механизма на инфекцията.

DeCS: STAPHYLOCCUS AUREUS; ЛАБОРАТОРИИ; МИКРОБИОЛОГИЯ.

Извършен е сборник от повече от 30 публикации, които обхващат нови изследвания за основните елементи, които са се намесили в механизмите на инфекцията, и диагностични методи, по-използвани за откриване Sthaphyloccus aureus в микробиологични лаборатории по света и Куба. Нови молекули, допринесли за инфекциозния процес, са във фазата на изследване, за някои от тях е описана ролята му в механизма. По-разширеният метод у нас е есето за коагулазата в епруветка. Беше решено да се информират методите, които се използват най-често при диагностицирането на този обект, включително най-новите, дори във фаза на проучване и стандартизация в някои случаи, както и да се дадат някои от основните елементи или фактори, които участват в механизма на инфекцията.

DeCS: СТЕПИЛОКОК АВРОЕН; ЛАБОРАТОРИИ; МИКРОБИОЛОГИЯ.

ВЪВЕДЕНИЕ

Беше решено да се проведе проучване, което позволява споменаване на използваните в момента методи за диагностика на S. aureus, и да търсят необходимата информация за оценка на ефективността на традиционния метод (тест с коагулаза на тръба), използван в Куба, с цел подобряване на грижите за пациентите в микробиологичните лаборатории на обектите на болничната мрежа в централно-източния регион на Куба, с изследвания проведено в лабораторията.

Стафилокоагулаза и някои фактори, участващи в механизма на инфекцията
The S. aureus коагулира декалцифицирана плазма поради производството на ензим, известен като стафилокоагулаза, който действа като активно средство в коагулацията, способно да превръща фибриногена във фибрин. Съществува положителна връзка между наличието му и вирулентността на патогена при хората. 11, 12

Ензимът присъства в две форми. 3
-. Безплатна коагулаза: Това е извънклетъчен протеин, който присъства в културалните филтрати, той реагира с реактивния фактор на коагулазата (FRC), присъстващ в плазмата, за да образува вещество, подобно на тромбин (стафилотромбин), действа индиректно при превръщането на фибриногена във фибрин.
-. Свързана с коагулаза: В културалния филтрат не присъства свързана коагулаза или фактор на аглутинация. Преобразува фибриноген в неразтворим фибрин директно без намесата на плазмените фактори.

Ролята на коагулазата in vivo Все още не е изяснено и все още е в спекулативното поле, въпреки че е добре изяснено, че този ензим участва в развитието на абсцеси, чрез образуването на фибринов слой около лезията, който предотвратява локализацията и фагоцитозата на патоген. две

Други фактори, участващи в неговата патогенеза, са идентифицирани чрез механизма на коагулация. Експресията на тези фактори, използвайки техники за генетична рекомбинация при ниско патогенни микроорганизми като Lactococcus lactis,позволява да се знае, че те са пряко свързани с тяхната патогенност. 13, 14

В допълнение към гореспоменатите молекули, S. aureus произвеждат голям брой разтворими антигени, сред които са и други ензими като каталаза, б - лактамаза, и мембранно закотвени антигени, включително, но не само токсини като ентеротоксини (осем типа), цитотоксини (пет вида), ексфолиативни цитоксини (два вида) и токсичен шоков токсин. Тези метаболити са основната причина за следоперативни инфекции на рани, имплантиране на пейсмейкъри, места на външни артериовенозни шунтове за хемодиализа, синдром на токсичен шок и при хранително отравяне. 3

Изследвания за определяне на коагулазата

По-долу са изброени най-често използваните в микробиологичните лаборатории методи за диагностика на S. aureus .

Бяха споменати шест метода, където бяха изложени някои предимства и недостатъци на тях. Аспект, който не е анализиран в прегледаната литература, е високата цена на тези техники на международния пазар, което предотвратява или възпрепятства тяхното обобщаване в слабо развити страни, те трябваше да използват по-опростените, но не по-малко полезни техники, установени преди няколко десетилетия и които остават в сила поради добрите резултати, получени с тях.

Страни с налични ресурси за изследвания, насочени към диагностициране на S. aureus, включете разширени техники, описани в този преглед, където най-добри резултати са постигнати с културални среди, които включват хромогенни субстрати, което позволява получаването на високи показатели за специфичност и чувствителност.

ЗАКЛЮЧЕНИЯ

1. Най-високата честота на S. ауреус, Среща се при кърмачета, главно новородени и кърмачета, както и при пациенти, претърпели операция.

2. Тестът за коагулаза на епруветката е най-широко разпространената и утвърдена техника в Куба, той показва резултати, които се различават по отношение на получените нива на позитивност, в зависимост от използваната плазма, което генерира нови изследвания от нашата група.

3. ELISAS не са добре установени за диагностика инвитро на това заболяване. Малко лаборатории използват присъствието на специфични антигени на S. aureus за такива цели, тъй като няма молекула, която да осигурява адекватна специфичност, която да позволява получаването на високо надеждни резултати и правилно стандартизирана система.

4. Най-добрите резултати, получени при диагностицирането на това заболяване, са получени с методите, базирани на хранителни среди с включени хромогенни субстрати, които показват високи показатели на специфичност и чувствителност в сравнение с другите методи, споменати тук за диагностика. инвитро.

БИБЛИОГРАФСКА ЛИТЕРАТУРА

1. Rojas N, Fernández N, Espino M, Fernández M. Модели на лекарствена резистентност на щамове Staphylococcus aureus от човешки клиничен произход. Rev Cubana Med Trop. 2001; 53 (1): 53-8.

2. Llop A, Valdez-Dapena M, Zuazo J. Медицинска микробиология и паразитология. ТИ. Град Хавана: Редакция Ciencias Médicas; 2001 г.

3. Murray P, Kobayashi G, Pfaller M, Rossenthal K. Medical Microbiology. 2ed. Испания: Ed. Harcourt Brace; 1999 г.

4. Espino M, Couto MJ, Lee M, Páez N, Meriño E. Синергичен ефект на пеницилин Gy канамицин при неонатална стафилококова септицемия. Rev Cubana Pediatr. 1998; 67 (3): 45-7.

5. Синдром на Floret D. Kawasaki: maladie toxinique?. Med Mal Infect. 1998; 285: 564-7.

6. Floret D, Gillet Y, Lina G. Текущи проблеми, породени от стапилококите в педиатрията. Le point sur. 2001; 30 (37): 1836-43.

7. Escarpanter JC, Cruz PM, Alfonso D. Нозокомиален сепсис в ортопедията. Едногодишно обучение. Rev Cubana Ortop Traumatol. 1996; 10 (1): 26-9.

8. Cabrera JL, Hernández A, González P, Durán C. Протезна инфекция при услуги за съдова хирургия. Rev Cubana Angiol de Cir Vasc. 2001; 2 (1): 5-9.

9. Eiff C, Proctor R, Peters G. Фатогените имат основна роля при вътреболничните инфекции. Postgrad Med. 2001; 10 (4): 63-76.

10. Cordero DM, García AL, Barreal RT, Jiménez J, Rojas N. Поведение на вътреболничната инфекция в терапевтични звена за период от 5 години. Rev Cubana Higiene y Epidemiol. 2002; 40 (2): 79-88.

11. Mac Faddin J. Биохимични тестове за идентифициране на бактерии от клинично значение. Балтимор: Издателство „Уилямсанд Уилайнс“; 1985 г.

12. Айрес л. Устройство и процедура за идентифициране на патогенни микроорганизми. Съединените щати. 1995; 5: 380-652.

13. Lowe AM, Bealtie DT, Deresewiccs RL. Идентифициране на нови гени на стафилококова вирулентност чрез in vivo технология на експресия. Mol Microbiol. 1998; 27: 967-76.

14. Que YA, Haefliger JA, Franciolli P, Moreillon P. Експресия на стабилизиращ фактор на Stapylococcus aureus в Lactocccus lactis subsp cremoris, като се използва нов вектор на сонда. Inf имунитет. 2000; 68 (6): 3516-22.

15. Greene C, McDevitt D, Vaudaux PE, Lew DP, Foster TJ. Адхезионни свойства на мутанти на Stapylococcus aureus с дефектни инфибронектин-свързващи протеини и изследвания върху експресията на fnb гени. Mol Microbiol. 1995; 17: 1143-152.

16. Flock JI, Heidmdahl SA, Schennings T. Преразглеждане на ролята на свързването на фибронектин при ендокардит, причинен от Staphylococcus aureus. Инфекциозен имун. 1996; 64: 1876-79.

17. MacDevitt DP, Francois P, Vaudaux E, Foster TJ. Молекулярна характеристика на натрупващия фактор (фибриногенов рецептор) на Stapylococcus aureus. Mol Microbiol. 1994; 11: 237-248.

18. Colque-Navarro P, Palma M, Soderquist B, Flock JI, Mollby R. Отговор на антитела при пациенти със стафилококова септицемия срещу два белтъка, свързващи фибриногена на Staphylococcus aureus: сгъстен фактор и извънклетъчен фибриноген свързващ протеин. Clin Diag Lab Immunolgy. 2000; 7 (1): 14-20.

19. Que YA, Haefliger JA, Franciolli P, Moreillon P. Преосмисляне на ролята на сцепващ се фактор на Stapylococcus aureus и свързващ фибронектин протеин чрез експресия в Lactocccus lactis. Инфекция и имунитет. 2001; 69 (10): 6296-6302.

20. Palma M, Wade D, Flock M, Flock J. Многобройни места за свързване във взаимодействието между извънклетъчен фибриноген-свързващ протеин от Staphylococcus aureus и фибриноген. J Biol Chem.1998; 273 (21): 13177-81.

21. Palma M, Shannon O, Quezada H, Berg A, Flock J. Извънклетъчен фибриноген свързващ протеин, Efb, от Staphylocooccus aureus блокира агрегацията на тромбоцитите. J Biol Chem.2001; 276: 31691.

22. Hussain M, Becker K, von Eiff C, Peters G, Herrmann M. Аналозите на Eap протеин са консервирани и преобладаващи в клиничните изолати на Staphylococcus aureus. Клинично-диагностичен лабораторен имунол. 2001; 8 (6): 1271-6.

23. Hussain M, Becker K, von Eiff C, Schrenzel J, Peters G, Herrmann M. Идентифициране и характеризиране на нов протеин на клетъчната повърхност на 38,5-килодалтон от Staphylococcus aureus с разширен спектър на свързваща активност за извънклетъчния матрикс и плазмените протеини. J Бактериални. 2001; 183 (23): 6778-6.

24. Castillo A, Pajuelo Y. Оценка на хигиенно-санитарното качество при формулите за парентерално хранене, използвани в две болници в град Лима. Rev Cubana Ortop Traumatol. 1996; 10 (1): 26-9.

25. Shanholtzer CJ, Peterson LR. Клинична лабораторна оценка на термонуклеазен тест. J Clin Pathol. 1982; 77 (5): 587-91.

26. Муриана П.М. Staphylococcus aureus: хранително заболяване. J Бактериални. 2003; 183 (23): 6778-6.

27. Perssone P, Bes M, Lina G, Vandenesh F, Brun X, Etrenne J. Сравнително представяне на шест комплекта за аглутинация, събрани чрез използване на типични и атипични щамове на S. aureus. J Clin Microb. 1997; 35: 1138-40.

28. Wilkerson M, McAllister S, Miller JM, Heiter BJ и Bourbeau PP. Сравнение на пет тест за аглутинация за идентифициране на Stapylococcus aureus. J Clin Microbiol. 1997; 35: 148-51.

29. Emmerling P, Schulze H, Lohneiss MT. Оценка на нов тест за латекс аглутинация за идентифициране на Staphylococcus aureus. Zentralbl Bakteriol Mikr. 1983; 253 (4): 462-65 .

30. Куин NE. Клинична ветеринарна микробиология. Лондон. Улф. 1994; 730: 118-26.

31. Weste TE, Cantey JR, Apicella MA, Burdash NM. Откриване на антитела срещу тейхоева киселина имуноглобулин G в експериментален ендокардит на Staphylococcus epidermidis. Инфекциозен имун. 1983; 42 (3): 1020-6.

32. Christensson B, Espersen F, Hedström SA, Kronvall G. Методологични аспекти на пептидогликановата серология на Staphylococcus aureus: сравнения между твърдофазен радиоимуноанализ и ензимно свързан имуносорбентен анализ. J Clin Microbiol. 1984; 19 (5): 680 ? 6.

33. Ryding U, Espersen F, Soderquist B, Christensson B. Оценка на седем различни ензимно-свързани имуносорбентни теста за серодиагностика на бактериемия на Staphylococcus aureus. Diagn Microbiol Infect Dis. 2002; 42 (1): 9-15.

34. West TE, Cantey JR, Burdash NM, Apicella MA. Ензимно-свързан имуносорбентен тест за откриване на имуноглобулинови G и M антитела към тейхоева киселина при вътресъдова стафилококова болест. Eur J Clin Microbiol. 1985; 4 (3): 286-90.

35. Matsuka YV, Anderson ET, Milner-Fish T, Ooi P, Baker S. Staphylococcus aureus фибронектин-свързващ протеин служи като субстрат за коагулационен фактор XIIIa: доказателства за катализиран от фактор XIIIa ковалентен омрежване към фибронектин и фибрин. Биохимия. 2003; 42 (49): 14643-52.

36. Poli MA, Rivera VR, Neal D. Чувствителни и специфични колориметрични ELISAS за ентеротоксини A и B на Staphylococcus aureus в урината и буфера. Токсикон. 2002; 40 (12): 1723-6.

37. Janda WM, Ristow K, Novak D. Оценка на стафилокок Rapidec за идентифициране на S. aureus, S. epidermitis и S. saprophyticus. J Clin Microbiol. 1994; 32 (9): 2056-59.

38. Gaillot O, Wetsh M, Fortineau N, Berche P. Оценка на Chromagar Staph. aureus, нова среда, за изолиране и предразполагаща идентификация на Stapylococcus aureus от човешки клинични проби. J Clin Microbiol. 2000; 38 (4): 1587-591.

Получено: 12 април 2004 г.
Приет: 8 ноември 2004 г.

Д-р Оскар Хернандес Бетанкур. Доктор по биологични науки и помощник изследовател. Carlos J. Finlay Висш институт по медицински науки. Център за имунология и биологични продукти CENIPBI. Камагуей, Куба. [email protected]

Цялото съдържание на това списание, с изключение на случаите, когато е идентифицирано, е под лиценз Creative Commons