Обобщение
Настоящото разследване оценява ефекта от секса и консумацията на диета, базирана на брашно от черен тон (HNA) по хематология и хистопатология при бройлери. Общо 200 бройлери бяха разпределени чрез напълно рандомизиран дизайн, с четири обработки (25 мъже и 25 жени/експериментална група). Различни нива на HNA (0, 1, 2 и 3%) бяха включени като източник на полиненаситени мастни киселини ω-3 (AGP ω-3) за 42 d. В края на експеримента бяха събрани проби от кръв и тъкани. Стойността на хематокрита (Хемат), общо протеини (PROT-T), концентрация на хемоглобин (Хемог), концентрация на еритроцитите (Еритро) и левкоцитите са количествено определени чрез диференциация (Левко): лимфоцити, хетерофили, моноцити, еозинофили и базофили. За анализа на променливите е използван дисперсионен анализ с факториална подредба 2 х 4, когато са открити разлики между леченията, тест на Дънкан за многобройни обхвати (P
Ключови думи: Бройлерско пиле, хематология, хистопатология, ω-3 полиненаситени мастни киселини, брашно от черен тон.
Въведение
Материали и методи
Животни и експериментален дизайн
Институционалните и национални насоки за грижи и използване на животни за експерименти бяха спазени и всички процедури бяха одобрени от комисията по етика на Университета в Колима. Двеста секс бройлери; (100) Еднодневни мъжки и (100) Еднодневни женски са получени от търговска люпилня. Птиците бяха настанени в идентични подови кошари (1 х 2 м), използващи стърготини като постеля. Температурата се контролира от термостат с начална температура 32 ° C през 1-вото d и намаления от 0-5 ° C/d, достигайки 21 ° C. Птиците бяха разпределени по напълно рандомизиран дизайн в четири обработки (25 мъжки и 25 женски/експериментална група). Всички данни бяха анализирани във факторна подредба 2 x 4, като се вземат предвид включването на пола и нивата на ANH като основни фактори.
Хранително лечение
Различни нива на включване на HNA (0, 1, 2 и 3%) бяха предложени като източник на AGP в търговските диети на базата на сорго и соя в продължение на 42 дни. Всички диети бяха изонитрогенни и изокалорични. Диетите бяха формулирани в три фази: i) иницииране (1-14 d), ii) растеж (15-35 d) и iii) прекратяване (36-42 d), формулировките на диетите са показани в таблица 1.
Аналитични тестове
Диетите се предлагат в смес и се анализират, за да се определи метаболизиращата енергия (EM) чрез калориметрична бомба (Robbins and Firman, 2006). Суров протеин (Настолен компютър) е количествено определена по метода 968.06 на Асоциацията на официалните аналитични химици (AOAC, 2002) с детерминатор азот/протеин. Съдържанието на фосфор и калций се измерва по метод 985.01 (AOAC, 2002) с помощта на емисионен спектрофотометър с индуктивно свързана плазма. Метионинът, цистеинът и лизинът бяха определени чрез високоефективна течна хроматография.
Вземане на кръв и определяне на хематологични параметри
Клането на птиците се извършва чрез обезкръвяване, кръвта се събира с помощта на 6 ml вакуумни епруветки с етилендиаминтетраоцетна киселина (EDTA) като антикоагулант и 8,5 ml епруветки с активатор на съсиреци и сепаратор гел. Некропсията беше извършена незабавно. Концентрацията на хемата се определя, използвайки стандартния метод на Wintrobe и хемоцитометър. Количеството Prot-T се определя чрез метода на Biuret и UV/Vis спектрофотометър. Концентрацията на хемог се определя чрез биохимия на кръвта. Концентрацията на еритрото се установява от камерата на Нойбауер, а общият брой и диференциацията на Левко се определят количествено чрез цитонамазка и оцветяване по Giemsa..
Хистологичен процес и анализ
Фрагменти от сърдечна и чернодробна тъкан и торбичката на Fabricio бяха фиксирани в 10% неутрален буфериран формалин и обработени в Патологичната лаборатория на Университета в Колима, Мексико. За хистологичния анализ се взема предвид приблизително 5 μm, всяка проба се монтира върху стъклени стъкла и се оцветява с хематоксилин и еозин. Хистологичната оценка е извършена от патолог, използвайки метода на сляпо във връзка с обработките със светлинен микроскоп и ниско (x10) и голямо (x40) увеличение. Правени са снимки, за да се илюстрират по-добре резултатите.
Статистически анализ
Сравнението между групите беше оценено чрез вариационен анализ. Разликите между леченията бяха изследвани с помощта на теста на Дънкан за многократен обхват. Значимостта (P стойност) е оценена на 0,05.
Резултати
Ефектите от секса и хранителния прием на ANH върху хематологията на бройлери са представени в таблици 2 и 3. Сексът не показва значителен ефект (P> 0,05) върху Hemat, Prot-T, Hemog, Eritro и Leuco. Диетичният прием на HNA не е показал значителен ефект (P> 0,05) върху Hemog, Erythro, лимфоцити, хетерофили и базофили.
Лечението с 3% HNA показа най-ниското ниво на Hemat и Prot-T (P
Взаимодействието между пола и ANH повлиява стойността на Hemat чрез увеличаване на хранителния прием на ANH (Таблица 2). Концентрацията на Leuko се увеличава при жени с 1 и 2% от ANH и при мъже с 0, 1, 2 и 3% от ANH. Полът с увеличаване на хранителния прием на HNA показа по-ниска концентрация в моноцитите. Не са наблюдавани големи аномалии при нито една от изследваните птици.
Дискусия
Диети, съдържащи AGP ω-6; може да насърчи много заболявания, включително ССЗ (Simopoulos, 2016). В тази връзка конюгираната линолова киселина (ALC) като биологичен елемент, способен да намали ССЗ (Shen et al., 2018). Следователно, с цел подобряване на консумацията на CLA от хората, се произвеждат обогатени храни, предимно животински продукти, или чрез добавяне на AGP ω-3 директно по време на фазите на растеж (15-35 d) и срок (36-42 d), или промяна на основния хранителен режим на животните.
Ω-3 AGP допринасят голям брой калории за бройлери. Доказано е обаче, че включването на повече от 6% PA в диетата на домашни птици може да има някои негативни ефекти, напр. Например нарушен оксидативен баланс при живите животни и по-висока окислителна чувствителност на производно месо (González et al., 2013; Leskovec et al., 2018). В настоящото проучване до 3% от хранителния прием на HNA се доставя като източник на AGP ω-3.
Биохимичните параметри на кръвта предоставят полезна информация за оценка на здравето на бройлерите и отразяват много метаболитни нарушения на органите и техните тъкани, напр. напр. сърдечна тъкан, чернодробна тъкан и бурса на Fabricio (Kudair and Al-Hussary, 2010). Серумните протеини се синтезират главно в черния дроб и наред с други функции участват в коагулацията и защитата срещу чужди агенти (Melillo, 2013). Според Harr (2002) стойностите на Prot-T на бройлери обикновено са по-ниски от тези на бозайниците, с обхват от 2,5 до 4,5 g/dL. Количествените стойности за Prot-T (таблица 2) са в съответствие с референтните стойности. 3% от диетичния прием на ANH показва по-ниска стойност на хема и Prot-T, тази ситуация предполага ниско ниво на глобулин (Глоб), който отхвърля процес на възпаление на черния дроб.
Високите нива на AGP ω-3 влияят на имунната функция при бройлери, като намаляват пролиферацията на лимфоцити, главно моноцити (Wang et al., 2011). Моноцитите се трансформират в макрофаги и участват активно във фагоцитозата. Следователно, намаляването на моноцитите (Таблица 3) също намалява фагоцитозата (Al-Khalifa et al., 2012). Изглежда тясната връзка между метаболизма на черния дроб и диетичния прием на метионин във всички изонитрогенни и изокалорични диети, разглеждани от експеримента, обяснява липсата на сърдечни лезии при пилетата. Предвид гореизложеното, предложението за прилагане на 3% от ANH за търговски фуражи за пилета се запазва, тъй като подобрява състава на CLA в месото и го прави важен източник на AGP ω-3 за потребителите.
Библиографски справки
1. Al-Khalifa, H., D. I. Givens, C. Rymer и P. Yaqoob. 2012. Ефект на ω-3 мастните киселини върху имунната функция при пилетата-бройлери. Наука за птиците 91 (1): 74-88.
2. AOAC. 2002. Официални методи за анализ: Ревизия 1. 17-то изд. Асоциация на официалните аналитични химици, Inc., Арлингтън, Вирджиния, САЩ.: 152-169.
3. Castro, G. M. I. 2002. Омега 3 мастни киселини: ползи и източник. Interciencia 27 (3): 128-136.
4. Чериан, Г. и З. Хаят. 2009. Дългосрочни ефекти на храненето на ленените семена върху чернодробните липидни характеристики и хистопатологията на кокошките носачки. Наука за птици 88 (12): 2555-2561.
5. Ganesan, B., C. Brothersen и D. J. McMahon. 2014. Обогатяване на храни с омега-3 полиненаситени мастни киселини. Критични отзиви в науката за храните и храненето 54 (1): 98-114.
6. Гонсалес, Е. Р. и С. Лийсън. 2000. Ефекти на мехенно масло и ленено семе при диети за бройлери върху сензорното качество и липидния състав на птиче месо. Британска наука за птици 41 (4): 481-488.
7. González, O. G., R. Sala, E. Cánovas, N. Abed и A. C. Barroeta. 2013. Консумацията на диетични ω-3 мастни киселини намалява отлагането на мазнини и размера на адипоцитите, но увеличава оксидативната чувствителност при пилетата-бройлери. Липиди 48 (7): 705-717.
8. Harr, K. E. 2002. Клинична химия на спътникови птичи видове: преглед. Ветеринарна клинична патология 31 (3): 140-151.
9. Khatibjoo, A., H. Kermanshahi, A. Golian и M. Zaghari. 2011. Ефектът на диетата ω-6: съотношение ω-3 и пол върху имунитета на разплодник на бройлери. Наука за птици 90 (10): 2209-2216.
10. Koppenol, A., E. Delezie, J. Aerts, E. Willems, Y. Wang, L. Franssens, N. Everaert и J. Buyse. 2014. Влияние на съотношението на диетичните ω-3 мастни киселини ейкозапентаенова киселина и докозахексаенова киселина върху производителността на разплодните бройлери, качеството на яйцата и състава на мастните киселини в жълтъка при различни възрастови групи. Наука за птиците 93 (3): 564-573.
11. Kudair, I. M. и N. A. J. Al-Hussary. 2010. Ефект на ваксинацията върху някои биохимични параметри при пилета-бройлери. Иракски вестник на ветеринарните науки 24 (2): 59-64.
12. Leskovec, J., A. Levart, A. Nemec Svete, L. Peric, M. Ethukic Stojcic, D. Zikic, J. Salobir и V. Rezar. 2018. Ефекти от добавките с алфа-токоферол, аскорбинова киселина, селен или тяхната комбинация в обогатени с ленено масло диети върху окислителния статус при бройлери. Наука за птици 97 (5): 1641-1650.
13. Martínez, A. J. A., A. M. J. González, R. L. A. Miranda, D. S. Carrillo и D. R. M. Castillo. 2016. Замяна на соево масло с масло от риба тон в диетата на пилетата като алтернатива за обогатяване на месото с омега-3 мастни киселини. Interciencia 41 (2): 851-856.
14. Melillo, A. 2013. Приложения на електрофорезата на серумен протеин в екзотична медицина за домашни любимци. Ветеринарни клиники на Северна Америка. Екзотични животински практики 16 (1): 211-225.
15. Morales, B. J. E., A. M. J. González, D. R. M. Castillo, R. O. F. Prado, J. L. Vázquez, V. X. Hernández, A. Menconi, G. Téllez, B. M. Hargis и D. S. Carrillo. 2013а. Ефект на времето и състава на мастните киселини в яйца от бели кокошки Leghorn, допълнени с масло от риба тон. Хранителни и хранителни науки 4 (9): 39-44.
16. Morales, B. J. E., A. M. J. González, D. R. M. Castillo, R. O. F. Prado, V. X. Hernández, A. Menconi, G. Téllez, B. M. Hargis и D. S. Carrillo. 2013б. Отлагане на мастни киселини върху месо от бройлери при пилета, допълнено с масло от риба тон. Хранителни и хранителни науки 4 (9): 16-20.
17. Pilevar, M., J. Arshami, A. Golian и M. R. Basami. 2011. Ефекти от диетичното ω-6: ω-3 съотношение върху имунната и репродуктивната системи на пилетата на пулета. Наука за птиците 90 (8): 1758-1766.
18. Ribeiro, T., M. M. Lordelo, S. P. Alves, R. J. Bessa, P. Costa, J. P. Lemos, L. M. Ferreira, C. M. Fontes и J. A. Prates. 2013. Директното допълване на диетата е най-ефективният начин за обогатяване на месо от бройлери с ω-3 полиненаситени мастни киселини с дълги вериги. British Poultry Science 54 (6): 753-765.
19. Робинс, Д. Х. и Дж. Д. Фирман. 2006. Оценка на метаболизираната енергия на брашно от птичи странични продукти за пилета и пуйки по различни методи. Международно списание за наука на птиците 5 (8): 753-758.
20. Shen, P., J. C. Kershaw, Y. Yue, O. Wang, K. H. Kim, D. J. McClements и Y. Park. 2018. Ефекти на конюгираната линолова киселина (CLA) върху натрупването на мазнини, активността и протеомичния анализ при Caenorhabditis elegans. Хранителна химия 249 (1): 193-201.
21. Simopoulos, A. P. 2016. Увеличаването на съотношението омега-6/омега-3 мастни киселини увеличава риска от затлъстяване. Хранителни вещества 8 (3): 128.
22. Wang, M. Z., L. Y. Ding, J. F. Wang, H. R. Wang и L. H. Yu. 2011. Ефекти на ω-6: съотношението на ω-3 полиненаситени мастни киселини върху съотношението хетерофил: лимфоцити и Т-лимфоцитни подгрупи в периферната кръв на гонглинг в Янчжоу. Наука за птици 90 (4): 824-829.
23. Zuidhof, M. J., M. Betti, D. R. Korver, F. I. Hernandez, B. L. Schneider, V. L. Carney и R. A. Renema. 2009. Обогатено с омега-3 месо от бройлери: 1. Оптимизиране на производствена система. Наука за птиците 88 (5): 1108-1120.