УНИВЕРСИТЕТ В ГРАНАДА ФАРМАЦЕВТЕН ФАКУЛТЕТ ФИЗИОЛОГИЧЕН ФАКУЛТУТ ИНСТИТУТ ПО ХРАНЕНЕ И ХРАНИТЕЛНИ ТЕХНОЛОГИИ ЖОЗЕ МАТАИКС ИЗСЛЕДВАНЕ НА ДАННА СТАБИЛНОСТ В СИТУАЦИЯ НА ХРАНИТЕЛНА ФЕРРОПЕННА АНЕМИЯ. ВЛИЯНИЕ НА КОНСУМАЦИЯТА НА КОЗЕ МЛЯКО ИЛИ КРАВА, ОБОГАТЕНО ИЛИ НЕ В ЖЕЛЕЗНА ДОКТОРНА ТЕЗА SILVIA Mª HIJANO FERNÁNDEZ 2010

фармацевтен

Редактор: Редакция на Университета в Гранада Автор: Silvia María Hijano Fernández D.L.: GR 3091-2010 ISBN: 978-84-693-3316-7

Този доклад за докторска дисертация е част от изследователския проект AGL2006-02301/ALI, субсидиран от Главна дирекция за научни и технически изследвания (DGICYT) на Министерството на образованието и науката.

Г-н Хавиер Диас Кастро. Постдокторант, нает в университета в Гранада. Г-жа Маргарита Санчес Кампос. Професор по физиология в университета в Гранада. Г-жа Тереза ​​Нестарес Плегезуелос. Договорен професор доктор от университета в Гранада. СЕРТИФИКУВАЙТЕ: Че изследователските работи са изложени в доклада на докторската дисертация: Изследване на ДНК стабилността в ситуация на хранителна желязодефицитна анемия. Влиянието на консумацията на козе или краве мляко, обогатено или не с желязо, е извършено под наше ръководство от адвоката Silvia Mª Hijano Fernández и ние считаме, че е в съгласие да бъде представено и да се стреми към докторска степен от университета в Гранада в съда по негово време да бъде назначен. И за протокол, в съответствие с настоящите разпоредби, ние удължаваме това в Гранада до 17 март, две хиляди и десет.

ПАМЕТ, ПРЕДСТАВЕНА от LDA. SILVIA Mª HIJANO FERNÁNDEZ ДА СЕ СЪДЪРЖА СТЕПЕНТА НА ДОКТОР ОТ УНИВЕРСИТЕТА В ГРАНАДА. Хавиер Диас Кастро проф. Д-р г-жа Маргарита Санчес Кампос проф. Д-р г-жа Тереза ​​Нестарес Плегезуелос г-жа г-жа Силвия Mª Хиджано Фернандес Гранада, 2010

ПРИЗНАВАНИЯ Искам да изкажа своята благодарност на всички хора, които с тяхното търпение, подкрепа и сътрудничество направиха възможна тази изследователска работа. Особено на моя директор, професор г-жа Маргарита Санчес Кампос, която от първия момент ми се довери, позволявайки ми да бъда част от нейната изследователска група. Благодарим ви за вашата отдаденост, любов и интерес, проявени във всеки един момент от работата. На моя директор, д-р Хавиер Диас Кастро, за близостта му от самото начало, моят учител по техники, с когото споделих констатациите, открити в това проучване, благодаря, че присъствате всеки ден в продължението на тази работа и за вашата наличност винаги и във всеки момент, дори в далечината. На моя директор, професор Тереза ​​Нестарес Плегезуелос, първият човек, който ме насърчи да започна това голямо приключение, което включва правене на докторска дисертация. Благодаря за вашия мъдър съвет. На професорите г-жа Инмакулада Лопес Алиага и г-жа Мария Хосе Муньос Алферес, в личен план за тяхната привързаност, близост и за ценната и щедра помощ в много моменти от тази работа. Работата с вас беше много лесна.

Беше лукс да бъда част от този проект. Гордост е да споделям тази работа с вас. На професор г-жа Магдалена Лопес-Фриас за нейната доброта и обич. На професор Д. Емилио Мартинес де Виктория, директор на Института по хранене и хранителни технологии, за предоставяне на мое разположение на съоръженията, където съм извършил експерименталната част на тази дипломна работа. На директора на Катедрата по физиология, професор г-жа Мария Лопес-Хурадо Ромеро де Ла Круз, за ​​това, че ми предостави човешките ресурси за развитието на тази теза. На Elisa Alcover, за нейната доброта при решаването на административни въпроси. Mercedes е добър приятел и страхотен колега по работа, понякога много съкрушен и го прави щастливи моменти. Вие сте специален. Благодаря ти. На Мария, Mª Ángeles, Сузана, Серджо, Педро и всички мои колеги от Института по хранене и хранителни технологии за тяхното дружество и безкористно сътрудничество и за желанието да посветят времето си, когато имам нужда.

На всички мои приятели, които, въпреки че не са свързани с тази работа, споделят с мен всичките ми илюзии. На моите родители за техните усилия и грижи, за това, че са пример за борба и отговорност и за това, че ме направиха такъв, какъвто съм. На моите братя Антонио, Хавиер, Хесус и Йоланда, както и на останалата част от семейството ми, които винаги са били до мен, като ме подкрепят и насърчават. На племенника ми Маурисио, който със своята компания ми е дарил моменти на спокойствие по време на писане. На Салва, съпруга ми, за голямата му подкрепа и винаги да бъде до мен, въпреки че понякога нещата са сложни. За споделяне на добри и лоши моменти. Обичам те. На дъщеря ми Патриша, най-прекрасното момиче, което е преживяло усилено всички моменти от завършването на тази теза. Благодаря ви за любопитството и за това, че познавате тази теза почти като мен.

На Патриция, моят успех в живота, посвещавам успеха си в науката на вас.

Който се съмнява и не разследва, става не само нещастен, но и несправедлив. Блез паскал.

1. ОБЕКТ. 1 2. БИБЛИОГРАФСКА ИНФОРМАЦИЯ 2.1. Желязото в храненето. 3 2.1.1. Въведение. 3 2.1.2. Липса на желязо. Хранителна желязодефицитна анемия. 2.1.3. Клинични прояви на хранителна желязодефицитна анемия. 7 2.1.4. Лечение на феродефицит. Перорално претоварване с желязо. 11 2.1.5. Патологии, свързани с претоварване с желязо. 15 2.1.5.1. Причини за претоварване с желязо. 15 2.1.5.2. Наследствена хемохроматоза. 17 2.1.5.3. Механизми на токсичност на желязото. 23 2.1.5.4. Последици от претоварване с желязо. 24 2.2. Функции на желязото. 28 2.3. Източници и бионаличност на желязна храна. 32 2.3.1. Хранителна употреба на желязо. 42 2.3.2. Изисквания. 45 2.3.3. Чревна абсорбция и транспорт на желязо. 50 2.3.4. Разпределение на желязото в тъканите и усвояването на клетките. 54 2.3.5. Депозити на желязо и метаболизъм. 56 2.3.6. Елиминиране. 59 2.3.7. Механизъм на желязната хомеостаза. 60 2.4. Стабилност и структура на ДНК. 67 2.4.1. Въведение. 67 2.4.2. Историческа справка. 68 2.4.3. Физикохимични свойства на ДНК. 70 2.4.4. Компоненти на генетичния материал. 71 2.4.5. Основно сдвояване. 75 2.4.6. Друг тип двойки основи. 78 2.4.7. ДНК структура. 81

2.4.8. Увреждане на генетичен материал. 88 2.4.9. Механизми за възстановяване на генетичен материал. 89 2.4.10. Определяне на стабилността на генетичния материал чрез алкален тест на Comet. 92 2.5. Хранителни характеристики на козето мляко. 99 2.5.1. Въведение. 99 2.5.2. Органолептични характеристики. 103 2.5.3. Състав на козе мляко. 104 2.5.3.1. Протеин от козе мляко. 106 2.5.3.2. Въглехидрати в козе мляко. 111 2.5.3.3. Липиди в козе мляко. 112 2.5.3.4. Минерален състав. 116 2.5.3.5. Витаминен състав на козе мляко. 121 2.5.3.6. Биоактивни фактори. 123 3. МАТЕРИАЛ И МЕТОДИ 3.1. Експериментален дизайн. 125 3.2. Опитани диети. 128 3.3. Аналитични техники. 131 3.3.1. Сух материал. 131 3.3.2. Мазна материя. 131 3.3.3. Съдържание на протеин. 131 3.3.4. Мокра минерализация. 131 3.3.4.1. Определяне на желязо. 132 3.3.5. Брой на червените кръвни клетки, хемоглобин, хематокрит, среден корпускуларен обем и тромбоцити. 134 3.3.6. Серумен феритин. 134 3.3.7. Серумно желязо, TIBC (общ капацитет за свързване на желязо) и наситеност на трансферин. 135 3.3.8. Определяне на стабилността на генетичния материал чрез гел електрофореза на изолирани клетки (алкален анализ на кометата). 135

3.3.9. Статистическо третиране. 140 4. РЕЗУЛТАТИ И ДИСКУСИЯ 4.1. Хематологични параметри в ЛПС. 141 4.2. Телесно тегло, чернодробно тегло, хепатосоматично съотношение и съдържание на желязо в ЛПС. 142 4.3. Стабилност на генетичния материал в ЛПС. 144 4.4. Съдържание на чернодробно желязо в PE. 148 4.5. Стабилност на генетичния материал в PE. 150 5. РЕЗЮМЕ И ЗАКЛЮЧЕНИЯ. 163 6. БИБЛИОГРАФИЯ. 167

на диети, базирани на краве или козе мляко, с нормално съдържание или с претоварване с Fe. Основната цел на това проучване е да се изследват хематологичните параметри, свързани с метаболизма на Fe, и да се оцени стабилността на генетичния материал на изолирани клетки (периферни лимфоцити в кръвта) в контролни животни или с експериментално индуцирана хранителна желязодефицитна анемия, както по време на установяването на патологията, така и по време на възстановяване, след консумация на диети на базата на краве или козе мляко, с нормално съдържание или хронично претоварване с Fe 2.

2. БИБЛИОГРАФСКА ИНФОРМАЦИЯ 2.1. ЖЕЛЯЗО В ХРАНЕНЕ 2.1.1. ВЪВЕДЕНИЕ По отношение на общественото здраве липсата на вяра е несъмнено основната причина за хранителна анемия. Анемията е патологичен процес, при който концентрацията на хемоглобин (Hb) в червените клетки е необичайно ниска. Няма съмнение, че дефицитът на Fe е причина за по-голямата част от анемиите. Fe дефицитната анемия или хранителната желязодефицитна анемия (NFA) се характеризира с намаляване или отсъствие на Fe отлагания, ниски нива на серумен Fe и Hb, намален хематокрит и повишени нива на тромбоцитите (Campos et al., 1998), нисък процент на насищане на трансферин, намаляване на серумния феритин и драстично увеличаване на общия Fe-свързващ капацитет или общия свързващ капацитет на желязото (TIBC). От друга страна, поради въздействието си върху развитието и растежа, устойчивостта на инфекции и връзката със смъртността на деца под две години, тя се счита за най-големия проблем на общественото здраве и най-честия хранителен дефицит в света. В допълнение, дефицитът на Fe има отрицателни ефекти върху работоспособността на децата и двигателното и психическото развитие, 3

на ДНК. Елиминирането на катехоламините в урината е свързано с промени в терморегулацията, така че в случаите, когато дефицитът на Fe е придружен от тежка анемия, пациентите изпитват понижение на телесната температура. Предполага се, че по време на този процес субектът губи топлина и в резултат на това се увеличава консумацията на кислород и плазмените нива на норепинефрин (Hillman and Ault, 1995). Стомашната биопсия, извършена при анемия поради дефицит на Fe, показва, че в 75% от случаите има различни степени на гастрит, придружени от намаляване на стомашната секреция, освен това е наблюдавана малабсорбция при деца, но не и при възрастни. Oski, 1993). При лабораторни изследвания за диагностика на дефицит на желязо обикновено се появяват следните хематични промени: - Хемоглобин: по-малко от 130 g/l при мъжете и 120 g/l при жените - Червени кръвни клетки: хипохромни и микроцитни (среда на корпускуларен обем, VCM