Текстът завършен

www.medigraphic.org.mx

Вестник по ендокринология и хранене том 21, № 2 • април-юни 2013 г. • стр. 69-73

генотипа

Оригинална статия

* Бакалавърски вътрешен лекар, Университет Ламар.

** Старши професор-изследовател, Институт по хронични дегенеративни заболявания, Департамент по молекулярна и геномна биология, Университетски център за здравни науки, Университет в Гуадалахара, Мексико.

Получено: 07-октомври 2013 г. Прието: 09-октомври 2013 г.

Тази статия може да се намери в пълната й версия на адрес http://www.medigraphic.com/endocrinologia

Асоциация на полиморфизма TT генотип

ген rs1130214

AKT1

затлъстяване,

сред възрастното население на Западно Мексико

Едуардо Бецера-Моралес, * Марта Елоиса Рамос-Маркес, ** Ма. Дел Кармен Карило-Перес **

Протеинът AKT1 е серин/треонин киназа, която се експресира в голямо разнообразие от тъкани, включително мастна тъкан; участва в инсулиновия сигнален път и в регулирането на липолизата. Материали и методи: В това проучване полиморфизмът на rs1130214 на гена AKT1 при 242 несвързани хора от Западно Мексико, за да се оцени тяхната роля в развитието на затлъстяването. Полиморфът rs1130214 е идентифициран чрез PCR-RFLP. Резултати:

От изследваните хора 30,43% са имали ИТМ (2)

www.medigraphic.org.mx

Индексът на телесна маса (ИТМ) е проста антропометрична мярка, най-често се използва за количествено определяне на затлъстяването и е инструмент в документацията за световното нарастване на разпространението на затлъстяването, наблюдавано през последните десетилетия. Затлъстяването е здравословен проблем в Мексико, като преобладаването при възрастни е между 32,4% (ENSANUT 2012) 1 и 32,8% (FAO 2013) .2 В мексиканското население наднорменото тегло и затлъстяването се характеризират с натрупване на мазнини с необичайно разпределение, придружени от метаболитни промени, които увеличават риска от развитие на други хронични заболявания като захарен диабет тип 2, високо кръвно налягане, сърдечно-съдови заболявания и някои видове рак, като рак на гърдата, наред с други.

Въпреки че се смята, че увеличаването на честотата на затлъстяването се дължи главно на промените в околната среда, тоест на заседналия начин на живот и висококалоричната диета, генетичните фактори, документирани от проучвания при близнаци от различни европейски страни и Австралия, обясняват 67% от вариацията на ИТМ; Тези проучвания показват, че половината от тази дисперсия е резултат от доминираща черта.3 За да се намери генетичният компонент в популация, която няма възможност за провеждане на проучвания при близнаци, като първа стъпка се провеждат изследвания за асоцииране в търсене на гени, които предразполагат към развитието на наднормено тегло, затлъстяване и разпределение на мазнините и по-късно се провеждат изследвания за генетична връзка. Изследвания, проведени върху мексиканското население, съобщават, че гени PCSK1,4 PON1,5 FTO6

Y. ABCA17 са свързани със затлъстяване при възрастни

плюс, ABCA1 е свързано с разпределението на мазнините.8

От друга страна, метаболитните промени, свързани с развитието на хронични заболявания, които са съпътстващи заболявания при наддаване на тегло, включват инсулинова сигнализация и заедно с това голям брой кандидат-гени. Ген AKT1 той кодира протеин със серин/треонин киназна функция, който в рамките на адипоцита регулира метаболитните пътища, стимулирани от инсулин, 9 които включват липогенеза и липолиза. В гена са описани няколко единични нуклеотидни полиморфизми AKT1, от които rs1130214 е изследван по-често при различни популации

да анализира влиянието му върху метаболизма; Съобщава се, че алелът Т е свързан с затлъстяване в някои популации, докато в други неговата асоциация е ограничена до пол, 10 с отклонение, приписвано на генотипа от 0,3.

Въз основа на горното и предвид различния етнически произход на мексиканското население, целта на настоящото проучване е да се оцени възможната връзка между полиморфизма rs1130214 на гена AKT1 и затлъстяване сред възрастното население на Западно Мексико.

материали и методи

В настоящото проучване на случая-контрол са участвали 242 възрастни от двата пола, които са посещавали кръвната банка на Гражданската болница "Фрай Антонио Алкалде". Групата от случаи е съставена от 140 индивида с наднормено тегло или затлъстяване (ИТМ ≥ 25 kg/m2), от които 45% са с наднормено тегло (BMI ≥ 25 и (3)

www.medigraphic.org.mx

и стерилна дестилирана вода за краен обем от 50 μL. Реакционната смес беше подложена на първоначална денатурация при 94 ° С в продължение на три минути и 35 цикъла на денатурация на съединения при 94 ° С, хибридизация при 59 ° С и полимеризация при 72 ° С, в продължение на 15 секунди всяка фаза, последвано от удължаване на окончателно при 72 ° С за 10 секунди. Амплифицираният продукт се наблюдава върху 3% агарозен гел, оцветен с етидиев бромид.

Впоследствие амплифицираните продукти се подлагат на ензимно разграждане с използване на XcmI ендонуклеаза. (New England BioLabs). В присъствието на G алела, 102 bp сегмент се усвоява, като се получават два фрагмента от 46 и 56 bp. За разлика от това, в присъствието на Т алела той не се усвоява. За ензимното ограничение се използва реакционна смес, съставена от 10 uL PCR продукт, 0.4 uL ендонуклеаза (концентрация 5000 U/ml), 2 uL буфер NEB2 и 8 uL стерилна дестилирана вода; Инкубира се във водна баня при 37 ° С в продължение на 60 минути. Накрая, получените фрагменти се разделят чрез 8% полиакриламидна гел електрофореза с 1Х TBE и се наблюдават чрез оцветяване със сребърен нитрат.

Получените данни бяха анализирани с програмата SPSS за Windows, версия 10. Извършен е описателен анализ на всички променливи. Непрекъснатите променливи бяха изразени като средно ± стандартно отклонение. Тестът χ2 се използва за анализ на непрекъснати променливи и за равновесието на Харди-Вайнберг. Проучването за асоцииране е проведено по статистическия метод за доминиране и рецесивност. Изчислено е съотношението на шансовете (OR) и съответният му доверителен интервал от 95%, свързан с алела T. В това проучване р-стойност (4)

www.medigraphic.org.mx

Този документ е изготвен от Medigraphic

с рецесивен ефект върху затлъстяването. Този полиморфизъм е изследван при възрастни10 и по-възрастни10,11 от различни популации с цел да се анализира метаболитното влияние на полиморфизма; Сред докладваните данни е установена положителна връзка със затлъстяването при възрастни индиански жени.10 Полиморфизмът rs1130214 се намира в екзона, който кодира 5 'нетранслирания регион на иРНК на гена AKT1,12 и неговата връзка с развитието на затлъстяване по различен начин между популациите се засилва от резултатите, които предполагат наличието на специфични за расата алели, които влияят върху активността на протеина; Тези резултати са получени от проучвания в клетъчни линии от различни популации по света, които са анализирани с хаплотипове на гена AKT1, от които е част и полиморфизмът rs1130214.13 Наличието на различни механизми, които регулират затлъстяването, се предполага и от проучвания върху животински модели при мишки, които показват, че липсата на AKT1 протеин (мишки, хомозиготни за делецията на гена AKT1) предпазва от затлъстяване, предизвикано от диета

Асоциацията, наблюдавана в настоящото проучване, беше представена сред предимно селско население, тъй като Гражданската болница в Белен "Fray Antonio Alcalde" (HCBFAA) предоставя здравни услуги на бедни хора, които не получават тази услуга в други институции от страната. Изследвания на аполипопротеин Е4, проведени в популация, която посещава HCBFAA, е документирано, че популацията има по-голямо американско влияние, 15,16, което я прави различна от популацията, която получава медицински грижи в други институции в същия регион. Поради резултатите, получени в настоящата работа, се препоръчва да се извърши проучване на популацията, което взема под внимание структурата на мексиканското население.

TT генотипът на полиморфизма rs1130214, разположен в гена AKT1 се свързва със затлъстяването при възрастни в западно Мексико и влиянието му е рецесивно.

1. Barquera S, Campos-Nonato I, Hernández-Barrera L, Pedroza-Tobías A, Rivera-Dommarco JA. Разпространение на затлъстяването при възрастни мексиканци, ENSANUT 2012. Здраве Обществен Мексико. 2013; 55: 151-160.

2. ФАО. Статистическо приложение. Състоянието на храните и земеделието. Организация по прехрана и земеделие на ООН. Рим. 2012, стр. 77. http://www.fao.org/docrep/018/ i3300e/i3300e.pdf

3. Maes HH, Neale MC, Eaves LJ. Генетични и екологични фактори в относителното телесно тегло и човешкото затлъстяване. Behav Genet. 1997; 27: 325-351.

4. Villalobos-Comparán M, Villamil-Ramírez H, Villarreal-Molina T, Larrieta-Carrasco E, León-Mimila P et al. PCSK1 rs6232 е свързан с детското и възрастно затлъстяване клас III в мексиканското население. PLoS One.2012; 7: e39037.

5. Martínez-Salazar MF, Almenares-López D, García-Jiménez S, Sánchez-Alemán MA, Juantorena-Ugás A et al. Корелация на връзката между параоксоназните (PON1) L55M и Q192R полиморфизми и затлъстяване при мексиканска популация: пилотно проучване. Гени Nutr. 2011; 6: 361-8.

6. Villalobos-Comparán M, Flores-Dorantes T, Villarreal-Molina T, Rodríguez-Cruz M, García-Ulloa AC et al. Генът на FTO е свързан със затлъстяването в зряла възраст в мексиканското население. Затлъстяване (Сребърна пролет). 2008; 16: 2296-301. 7. Виляреал-Молина Т, Агилар-Салинас Калифорния, Родригес-Крус

M, Riaño D, Villalobos-Comparan M и Групата за метаболизъм. ATP-Binding Cassette Transporter A1 R230C Variant Aff влияе на нивата на HDL холестерол и ИТМ в мексиканското население. Диабет. 2007; 56: 1881-1887. 8. Виляреал-Молина Т, Посадас-Ромеро С, Ромеро-Идалго

S, Antúnez-Argüelles E, Bautista-Grande A et al. Вариантът на ABCA1 гена R230C е свързан с намален риск от преждевременно заболяване на коронарната артерия: изследване на генетиката на атеросклеротичната болест (GEA). PLoS One.2012; 7 (11): e49285. doi: 10.1371/journal.pone.0049285. Epub 2012 9 ноември.

9. Fischer-Posovszky P, Tews D, Horenburg S, Debatin KM, Wabitsch M. Диференциална функция на AKT1 и AKT2 в

Таблица II. Разпределение на генотиповете и честотите на алелите за полиморфизма rs1130214 на гена AKT1

в населението на западно Мексико.

Група GG GT TT G T

www.medigraphic.org.mx

човешки адипоцити. Ендокринол на Mol Cell. 2012; 358: 135-43. doi: 10.1016/j.mce.2012.03.018.

10. Devaney JM, Gordish-Dressman H, Harmon BT, Bradbury MK, Devaney SA et al. Полиморфизмите на AKT1 са свързани с риск от метаболитен синдром. Hum Genet. 2011; 129: 129-39. doi: 10.1007/s00439-010-0910-8.

11. McKenzie JA, Witkowski S, Ludlow AT, Roth SM, Hagberg

JM. Генотипът AKT1 G205T влияе върху затлъстяването

метаболитни фенотипове и техните отговори на аеробни тренировки при по-възрастни кавказци. Exp Physiol. 2011; 96: 338-47. doi: 10.1113/expphysiol.2010.055400.

12. Norton N, Williams HJ, Dwyer S, Carroll L, Peirce T et al. Анализ на асоциацията на AKT1 и шизофрения в контролна проба за британски случай. Schizophr Res.2007; 93: 58-65. 13. Harris SL, Gil G, Robins H, Hu W, Hirsh fi eld K et al.

Откриване на функционални детекторни еднонуклеотидни полиморфизми, които засягат апоптозата. Proc Natl Acad Sci САЩ. 2005; 102: 16297-16302.

14. Wan M, Easton RM, Gleason CE, Monks BR, Ueki K et al. Загубата на AKT1 при мишки увеличава енергийните разходи и предпазва от затлъстяване, предизвикано от диета. Mol Cell Biol.2012; 32: 96-106. doi: 10.1128/MCB.05806-11.

15. Aceves D, Ruiz B, Nuño P, Roman S, Zepeda E, Panduro A. Хетерогенност на полиморфизма на аполипопротеин E в различни мексикански популации. Hum Biol.2006; 78: 65-75. 16. Santos A, Salguero ML, Gurrola C, Muñoz F, Roig-Melo E,

Panduro A. Алелът на epsilon4 на гена на аполипопротеин Е е потенциален рисков фактор за тежестта на макуларния оток при мексикански пациенти с диабет тип 2. Офталмологичен Genet. 2002; 23: 13-19.

Дра. В C. Ma. Дел Кармен Карило Перес Институт по хронични дегенеративни заболявания Университетски център по здравни науки Университет в Гуадалахара

Calle Sierra Mojada No. 760, врата 7, сграда Q, второ ниво,