Испанската асоциация по педиатрия има за една от основните си цели разпространението на строга и актуална научна информация за различните области на педиатрията. Anales de Pediatría е органът за научно изразяване на асоциацията и представлява превозното средство, чрез което сътрудниците комуникират. Той публикува оригинални трудове за клинични изследвания в педиатрията от Испания и страни от Латинска Америка, както и преглед на статии, изготвени от най-добрите специалисти във всяка специалност, годишните съобщения на конгреса и протоколите на Асоциацията, както и ръководства за действие, изготвени от различните общества/Специализирани Секции, интегрирани в Испанската асоциация по педиатрия. Списанието, еталон за испаноезичната педиатрия, е индексирано в най-важните международни бази данни: Index Medicus/Medline, EMBASE/Excerpta Medica и Index Médico Español.

lactobacillus

Индексирано в:

Index Medicus/Medline IBECS, IME, SCOPUS, Разширен индекс за научно цитиране, Доклад за цитиране на списания, Embase/Excerpta, Medica

Следвай ни в:

Импакт факторът измерва средния брой цитати, получени за една година за произведения, публикувани в публикацията през предходните две години.

CiteScore измерва средния брой цитати, получени за публикувана статия. Прочетете още

SJR е престижна метрика, базирана на идеята, че всички цитати не са равни. SJR използва алгоритъм, подобен на ранга на страницата на Google; е количествена и качествена мярка за въздействието на дадена публикация.

SNIP дава възможност за сравнение на въздействието на списанията от различни предметни области, коригирайки разликите в вероятността да бъдат цитирани, които съществуват между списанията на различни теми.

Научният интерес към млечнокиселите бактерии като насърчители на здравето започва през 1908 г. от Metchnikoff, който наблюдава дълголетието и доброто здраве на българските фермери, консумирали големи количества кисело мляко, млечен продукт, ферментирал от лактобацили 1. Тук се получава терминът пребиотик, който дефинира жив микроорганизъм, който при поглъщане в достатъчно количество има положителен ефект върху здравето. Всъщност храна, която съдържа пробиотик, е частен случай на функционална храна 2,3 .

Въпреки това млечните продукти, съдържащи мъртви микроорганизми, не могат да се считат за функционална храна, тъй като те не могат да окажат своето благотворно въздействие върху гостоприемника. Бактериите, използвани като пробиотици, идват за колонизиране на червата на гостоприемника, но съществен фактор при избора на пробиотик е способността му да оцелява в чревната микросреда, където те упражняват своята дейност. Последните изследвания се фокусират върху лактобацилите, както като вид млечна бактерия (метаболизира лактозата до млечна киселина), така и като род, присъстващ в стомашно-чревния тракт на човека, като крайният илеум и дебелото черво са неговите колонизационни ниши.

Един от проблемите пред индустрията е да се знае кои щамове на Lactobacillus spp. Те трябва да включват пробиотици в своите продукти. Това е така, защото в един и същи род и дори в рамките на един и същи вид, не всички щамове са еквивалентни по отношение на тяхната полезна дейност. В действителност пробиотичните свойства са изключителни за малка част от щамовете. Понастоящем има малко продукти, които могат да претендират с научна подкрепа за тяхното съдържание в пробиотични щамове, които показват конкурентно предимство в чревната екосистема на човека.

Целта на нашето изследване беше да се анализират характеристиките на чревната микробна флора на деца, получили ферментирало мляко с Lactobacillus casei и Streptococcus thermophilus в диетата си и тяхното въздействие върху секреторните нива на имуноглобулин.

материали и методи

Проспективно, рандомизирано експериментално проучване е проектирано с две паралелни групи. Включени са общо 35 деца, от които 18 съответстват на експерименталната група (A) и 17 на контролната група (B). Група А се състои от 10 момчета (55,6%) и 8 момичета (44,4%) със средна възраст 2 години (стандартно отклонение [SD]: 0,6 години; диапазон: 1-3 години). 18-те деца от група А получават в диетата си ферментирало мляко (500 ml/ден) с L. casei и S. thermophilus (My Primer Danone®) в продължение на 6 седмици (таблица 1) и след това децата се хранят 6 още седмици със същото стандартно краве мляко, което са получавали преди да влязат в проучването. 17-те деца от група В са били хранени със стандартно нормално краве мляко (500 ml/ден) през целия период на изследване.

Нивата на секреторния имуноглобулин А (IgA) в слюнката от група А са оценени в началото на проучването и 6 седмици след започване на храненето с ферментирало мляко с L. casei и S. thermophilus .

Събиране на проби от изпражнения

Фекалиите бяха събрани за изследване на чревната флора на 0, 6 и 12 седмици и в двете групи. От всяко дете бяха събрани две проби на изпражненията, едната беше прехвърлена в микробиологичната лаборатория в контейнер с анаеробна атмосфера (Anaerocult Merck) за изследване на анаеробни микроорганизми, а друга в аеробна атмосфера за изследване на аеробни бактерии. Това прехвърляне е извършено в рамките на първите 12 часа след събирането на пробите.

Проведено е количествено бактериологично проучване. От 1 g изпражнения, разтворени в 1 ml пептонова вода, бяха направени 9 серийни разреждания от 1/10, всяко посято, като се използва калибриран контур 1/100, в следните хранителни среди: Мозъчен инфузионен агар за изследване на общото количество анаеробна флора, NBGT агар за Bacteroides spp., Beerens агар за Bifidobacterium spp., MRS агар и Rogosa за Lactobacillus spp.; всички те се инкубират в продължение на 3 до 5 дни в анаеробна атмосфера при 37 ° С.

Количественото изследване на ентеробактериите беше проведено чрез засяване на деветте разреждания върху агар на MacConkey, инкубирани 24 часа при 37 ° С в аеробна атмосфера и сеитба върху алур от Колумбия с 5% кръв и налидиксинова киселина, инкубирани при 37 ° С в продължение на 48 часа в аеробна с 5% CO 2 за откриване на грам-положителна флора.

Резултатите от количествените изследвания са изразени като брой единици, образуващи колонии на грам фекалии (CFU/g). Тази информация относно броя на колониите е представена по два различни начина: един, средният брой на колониите в три последователни разреждания; а другата средната стойност на последното разреждане с растеж. Сравненията, направени въз основа на първата променлива, бяха направени по логаритмична скала в база 10 и за последното разреждане с растеж експонентата беше взета директно под внимание. В този случай не може да се счита, че променливата има нормално разпределение, така че непараметричният тест на Ман-Уитни е използван при извършване на сравнения. В случай на Lactobacillus spp. е извършен качествен подход и е оценена честотата на децата, които са представили растеж на споменатите бактерии.

Извършен е описателен анализ на наличната информация, който включва честотни таблици за категориални променливи и изчисляване на мерките за централна тенденция и дисперсия за непрекъснати променливи. За сравнение на количествените променливи между изследваните групи е използван t тест на Student за независими проби, след като е извършена логаритмична трансформация на данните. В случая на Lactobacillus spp. във фекалиите се използва хи-квадрат тест за сравняване на групите.

За да се анализира еволюцията на пациентите по отношение на категориалните променливи (честота на Lactobacillus spp.), Беше използван тестът McNemar.

Тази работа беше одобрена от Комитета по етика на детската болница Vall d'Hebron в Барселона. В допълнение, процедурите, използвани при пациенти и контролите са извършени след получаване на информирано съгласие от родителите.

Аеробни грам-отрицателни бацили

Таблица 2 показва резултатите, получени във връзка с аеробни грам-отрицателни бацили. Като се вземе предвид средният брой на колониите в три последователни разреждания, статистически значими разлики се наблюдават само в данните, съответстващи на първите 6 седмици след началото на проучването, като се наблюдава, че по това време образуващите колонии единици (CFU)/g изпражнения е по-висока в група В, отколкото в група А (р = 0,0203) и същото се случва, когато тези микроорганизми се анализират, като се вземе предвид последното разреждане на изпражненията с бактериален растеж (р = 0,0444).

Грам-положителна аеробна флора

Не са наблюдавани значителни разлики в състава на общата аеробна грам-положителна флора между групите по всяко време по време на проучването (Таблица 3).

Обща анаеробна флора, Bifidobacterium spp. и Bacteroides spp.

Чрез анализ на последното разреждане на изпражненията с бактериален растеж и сравняване на растежа на Bacteroides spp. В групи A и B, през първите 6 седмици след започване на проучването, в група A са наблюдавани по-ниски стойности, отколкото в B, с цифри, много близки до статистическата значимост (p = 0,0662) (Таблица 4).

В общата анаеробна флора и в количеството Bifidobacterium spp. не са наблюдавани значителни разлики между 2-те групи деца по всяко време на проучването (таблици 5 и 6).

Таблица 7 показва, че в група А има по-висок дял на децата, при които Lactobacillus spp. в чревната флора, отколкото в група В, тези разлики са по-очевидни от шестата седмица на проучването и стават статистически значими (р = 0,028) на 12 седмици.

Секреторният IgA в група А се оценява в два момента, в началото и на 6 седмици поглъщане на ферментиралото мляко. Налице е статистически значимо увеличение (р = 0,0063) от изходната средна стойност от 2,5 mg/dl на изходно ниво до средна стойност от 3,4 mg/dl за 6 седмици. Средната изходна стойност на IgA за контролната група е 2,47 mg/dl.

През последното десетилетие са проведени различни проучвания, за да се оценят ефектите върху здравето, които може да има консумацията на ферментирали млечни продукти (кисело мляко), допълнени с живи бактерии. Важна пречка, с която млечнокиселите бактерии могат да се сблъскат след поглъщането, е киселинната секреция на стомашно-чревния тракт, която представлява най-важният защитен механизъм на организма срещу повечето от погълнатите патогенни микроорганизми.

В проучване, проведено от Djouzi et al 6, беше показано, че оцеляването на бактериите по време на стомашно-чревния транзит зависи от бактериалните видове и комбинацията от млечнокисели бактерии в продукта. Те също така показват, че L. casei оцелява при преминаването си през стомашната бариера, когато се поглъща с диети с ферментирало мляко, откривайки голям брой жизнеспособни клетки във фекалиите. Тази бактерия е устойчива на стомашна киселина и жлъчка и остава жизнеспособна в диапазон на pH от 3,0-7,0 7. Различните щамове на този микроорганизъм оцеляват по време на стомашно-чревния транзит и достигат до крайния илеус в достатъчно количество, за да развият своето физиологично действие.

Последните проучвания също показват, че редовният прием на ферментирало мляко от L. casei предпазва от ротавирусна диария при деца. В червата тази бактерия възстановява целостта на лигавицата и намалява инфекцията на нивото на микровилините на чревната лигавица 8 .

Получените в това проучване микробиологични данни показват, че между 6-12 седмици след поглъщане на мляко, ферментирало с L. casei и S. thermophilus в група А, има по-висок дял на децата, при които L. casei е изолиран в чревната флора, отколкото в групата на контролните деца. Поради тази причина можем да проверим оцеляването на тази млечна бактерия в храносмилателния тракт и нейната чревна колонизация. Други проучвания също са открили значително увеличаване на изолирането на L. casei в изпражненията на деца, хранени с мляко, ферментирало с този микроорганизъм 9-12. В допълнение, други автори показват, че L. casei може да се намира във фекалиите до след 2 и до 4 седмици след прекъсване на приема на мляко, допълнено с посочените бактерии, както се случва и в нашето проучване 9,12,13. Други автори, напротив, откриват намаляване на Lactobacillus в изпражненията след приема на добавената млечна формула 14,15 .

В изпражненията на децата, принадлежащи към експерименталната група на това проучване, ние открихме намаляване на количеството аеробни грам-отрицателни бацили и Bacteroides spp., Ефект, който може да се дължи на блокирането на местата на адхезия на тези микроорганизми до чревната лигавица от L. casei .

Възможността за предизвикване на имунен отговор чрез храносмилателния тракт е известна от около век. Има милиони взаимодействия между бактериите, епитела и подлежащата имунна тъкан, които малко по малко програмират и модулират много мощна и сложна защитна система 16,17. Всъщност нормалната чревна микрофлора е най-важният ендогенен стимул за развитието и узряването на нормалната имунна система както в нейния системен отговор, така и на локално (лигавично) ниво 18 .

В настоящото проучване в групата на децата, хранени с мляко, ферментирало с L. casei, е демонстрирано значително увеличение (р = 0,0063) на секреторните стойности на IgA на 6 седмици след поглъщането, което ще покаже ефекта на благотворната имунна система, причинена от бактериите от тяхната чревна колонизация. Vitiñi и сътр. 19 показват, че L. casei е способен да предизвика увеличаване на броя на клетките, продуциращи IgA, в lamina propria на тънките черва, като този ефект зависи от дозата. Тези автори също показват, че тази имуностимулираща способност не може да бъде обобщена за всички родове или видове млечнокисели бактерии, но че това свойство е ограничено до определени щамове и следователно не всички млечнокисели бактерии могат да се използват за стимулиране на чревната имунна система.

В заключение, това проучване предоставя доказателства за оцеляването на L. casei в чревния тракт и неговия имуностимулиращ ефект върху значително увеличение на секреторния IgA.

Кореспонденция: д-р R. Tormo Carnicer.
Болница за майки и деца Vall d'Hebron.
Детско отделение за гастроентерология и хранене.
P.º Вал д’Еброн, 119-129. 08035 Барселона. Испания.
Имейл: [email protected]

Получено през август 2005. Прието за публикуване през юли 2006 г.